文档介绍：紫外可见光分光光度法
§1概述
基于物质对光选择性吸收而建立分析方法称为吸光光度法，包含紫外可见分光光度法及红外光谱法等。紫外可见分光光度法所用光谱区域为200～780nm,其中可见分光光度法为400～780 nm,紫外分光度法为200～400 nm。～1000µm。
紫外可见分光光度法是仪器分析法中应用最为广泛分析方法之一，它含有以下特点。
1．灵敏度高光度法常见于测定试样中微量成份，甚至可测定痕量成份。
2．正确度较高
3．适用范围广几乎全部无机离子和很多有机化合物全部能够直接或间接地用吸光光度法测定。
4．操作简便、快速、仪器价格不昂贵。
§2 分光光度法基础原理
一．吸收光谱分类
在分子中存在着电子运动，和组成份子各原子间振动和分子作为整体转动。在每一个电子能级上有很多间距较小振动能级，在每一个振动能级上又有很多间距更小转动能级。因为这个原因，处于同一电子能级分子，可能因振动能量不一样而处于不一样能级上。同理，处于同一电子能级和同一振动能级上分子，因为转动能量不一样而处于不一样能级上。
当用光照射分子时，分子就要选择性吸收一些波长（频率）光而由较低能级E跃迁到较高能级E‘上，所吸收光能量就等于两能级能量之差：
△E= E‘－E
其光频率为：γ=△E/h
或光波长为：λ=hc/△E
因为分子选择性吸收了一些波长光，所以这些光能量就会降低，将这些波长光及其所吸收能量按一定次序排列起来，就得到了分子吸收光谱。
分子吸收光谱有：
远红外光谱、红外光谱及紫外-可见光谱三类。
分子转动能级跃迁，需吸收波长为远红外光，所以，形成光谱称为转动光谱或远红外光谱。
分子振动能级差通常需吸收红外光才能产生跃迁。在分子振动时同时有分子转动运动。这么，分子振动产生吸收光谱中，包含转动光谱，故常称为振-转光谱。
电子跃迁吸收光波长关键在真空紫外到可见光区，对应形成光谱，称为电子光谱或紫外-可见吸收光谱。
二．光选择性吸收和物质颜色关系
1．可见光颜色和互补色：
在可见光范围内，不一样波长光颜色是不一样。日常所见白光（日光、白炽灯光等）是一个复合光，它是由多种颜色光按一定百分比混合而得。利用棱镜等分光器可将它分解成红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等不一样颜色单色光。
白光除了可由全部波长可见光复合得到外，还可由合适两种颜色光按一定百分比复合得到。能复合成白光两种颜色光叫互补色光。
l/nm
颜色
互补光
400-450
紫
黄绿
450-480
蓝
黄
480-490
绿蓝
橙
490-500
蓝绿
红
500-560
绿
红紫
560-580
黄绿
紫
580-610
黄
蓝
610-650
橙
绿蓝
650-760
红
蓝绿
2．物质颜色和吸收光关系：
当白光照射到物质上时，假如物质对白光中某种颜色光产生了选择性吸收，则物质就会显示出一定颜色。物质所显示颜色是吸收光互补色。
3．吸收曲线（吸收光谱）及最大吸收波长
1．吸收曲线：每一个物质对不一样波长光吸收程度是不一样。假如我们让多种不一样波长光分别经过被测物质，分别测定物质对不一样波长光吸收程度。以波长为横坐标，吸收程度为纵坐标作图所得曲线。
例：***
lmax = 279nm (e =15)
2．吸收峰和最大吸收波长lmax
吸收曲线表明了某种物质对不一样波长光吸收能力分布。曲线上各个峰叫吸收峰。峰越高，表示物质对对应波长光吸收程度越大。其中最高那个峰叫最大吸收峰，它最高点所对应波长叫最大吸收波长，用λmax表示。
3．物质吸收曲线和最大吸收波长特点：
1）不一样物质，吸收曲线形状不一样，最大吸收波长不一样。
2）对同一物质，其浓度不一样时，吸收曲线形状和最大吸收波长不变，只是吸收程度要发生改变，表现在曲线上就是曲线高低发生改变。
三．光吸收定律——朗伯—比耳定律
（一）．基础概念：当强度为I0一定波长单色入射光束经过装有均匀待测物溶液介质时，该光束将被部分吸收Ia，部分反射Ir ，余下则经过待测物溶液It ，即有：
I0=Ia + It +Ir
假如吸收介质是溶液（测定中通常是溶液），式中反射光强度关键和器皿性质及溶液性质相关，在相同测定条件下，这些原因是固定不变，而且反射光强度通常很小。所以可忽略不记，这么：
I0=Ia+It
即：一束平行单色光经过透明吸收介质后，入射光被分成了吸收光和透过光。
待测物溶液对此波长光吸收程度能够透光率T和吸光度A用来表示。透光率——透光率表示透过光强度和入射光强度比值，用T来表示，计算式为：
T= It /Io
T常见百