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实验四酶的特性实验.docx

上传人:guoxiachuanyue009 2020/11/22 文件大小:15 KB

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文档介绍

文档介绍:说明: 本实验由四个小实验组成 , 其中第一个实验 (酶的专一性 ) 必做, 其她三个小实验选做 ( 至少做一个 )
写实验报告时 , 可以只写需要做的实验内容 ! 实验四 酶的特性实验
一、实验目的
酶就是生物催化剂 ,生物体内化学反应基本上都就是在酶的催化下进行的。通过本实验 了解酶催化的特异性、温度对酶活力的影响、 PH 对酶活力的影响、激活剂与抑制剂对酶活 力的影响 ,对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。
二、实验内容
本实验由酶的专一性实验、温度对酶活力的影响、 PH 对酶活力的影响、激活剂与抑制 剂对酶活力的影响 4 个小实验组成。
(一) 酶的专一性
1、实验原理
本实验以唾液淀粉酶对淀粉与蔗糖的作用为例 ,来说明酶的专一性。淀粉与蔗糖无还原
性,唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性二糖的麦芽糖 , 但不能催化蔗糖的水解。 用班氏试剂检
查糖的还原性。班氏试剂为碱性硫酸铜 ,能氧化具还原性的糖 ,生成砖红色沉淀氧化亚铜。
2、材料、仪器与试剂
(1)材料 :新鲜配制的唾液及其稀释液
(2)仪器 :恒温水浴 ;沸水浴 ;试管及试管架 ;
⑶试剂:2%蔗糖溶液;溶于0、3% NaCI的0、5%淀粉溶液;班氏试剂。
3、实验操作
(1) 稀释唾液的制备
唾液的获取
用一次性杯取一定量的饮用水 ,漱口以清洁口腔 , 然后在嘴中含 10-20mI 饮用水 ,轻漱
2min 左右时间 , 即可获得唾液的原液 , 内含唾液淀粉酶。
不同稀释度唾液的制备 ( 用大试管 )
本实验需制备 1:1、 1:5 、 1:20 、 1:50 、 1:200 等五个不同浓度的稀释唾液。
举例说明 :1:5 指的就是稀释了 5 倍的唾液 , 制备方法为 1份原液 +4 份蒸馏水。
1:20 指的就是稀释了 20倍的唾液,制备方法为1份1:5的稀释液+3分蒸馏水。
(2)唾液淀粉酶最佳稀释度的确定 (严格按表1添加顺序做实验,用小试管做实验)
表1唾液淀粉酶稀释度的确定
AvV 口
吕号
1(1:1)
2(1:5)
3(1:20)
4(1:50)
5(1:200)
0、5%淀粉溶液
(滴)
4
4
4
4
4
稀释唾液(ml)
1
1
1
1
1
37 C恒温水浴中保温 5分钟
班氏试剂(ml)
1
1
1
1
1
沸水浴2〜3分钟
实验结果
(2)淀粉酶的专一性
表2淀粉酶专一性实验
AvV 口
吕号
1
2
3
4
5
6
0、5%淀粉溶液(滴)
4

4

4

2%蔗糖溶液(滴)

4

4

4
最佳稀释度唾液(ml)


1
1
煮沸过的最佳稀释度唾液(ml)




1
1
蒸馏水(ml)
1
1




37 C恒温水浴中保温
5分钟
班氏试剂(ml)
1
1
1
1
1
1
沸水浴2〜3分钟
实验结果
(二)温度对酶活力的影响
1、实验原理
酶的催化作用受温度的影响。在最适温度下 ,酶的反应速度最高。淀粉与可溶性淀粉遇
碘呈