文档介绍：高考生物选修3知识点总结
专题一基因工程
一、基因工程基础工具
1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）
功效：能够识别双链DNA分子某种特定核苷酸序列，而且使每一条链中特定部位两个核苷酸之间磷酸二酯键断开，所以含有专一性。
结果：经限制酶切割产生DN***段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
2、“分子缝合针”——DNA连接酶
（1）两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4—DNA连接酶）比较：
①相同点：全部缝合磷酸二酯键。②区分：E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端； T4DNA连接酶能缝合两种末端，但效率较低。
3、“分子运输车”——运载体
（1）载体含有条件：① 能在受体细胞中复制并稳定保留。② 含有一至多个限制酶切点，供外源DN***段插入。 ③ 含有标识基因，供重组DNA判定和选择。
（2）最常见载体是:质粒，它是一个裸露、结构简单、独立于细菌染色体之外，并含有自我复制能力双链环状DNA分子。
（3）其它载体：噬菌体衍生物、动植物病毒
二、基因工程基础操作程序
1、目标基因获取
从基因文库中取得、人工合成、PCR扩增。人工合成目标基因常见方法有反转录法_和化学合成法_。（了解基因组文库和CDNA文库？；怎样从基因文库中提取目标基因？？）
2、基因表示载体构建（关键步骤）
组成：目标基因＋开启子＋终止子＋标识基因
（1）开启子：是一段有特殊结构DN***段，在基因首端，是RNA聚合酶识别和结合部位，能驱动基因转录出mRNA，最终取得所需蛋白质。
（2）终止子：也是一段有特殊结构DN***段，在基因尾端。
（3）标识基因作用：是为了判定受体细胞中是否含有目标基因，从而将含有目标基因细胞筛选出来。常见标识基因是抗生素基因。
3、将目标基因导入受体细胞_
（1）常见转化（导入）方法：
导入植物细胞：常见农杆菌转化法（双子叶植物），其次还有基因枪法和花粉管通道法等。
导入动物细胞：最常见方法是显微注射技术。此方法受体细胞多是受精卵。
导入微生物细胞：感受态细胞法。先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表示载体DNA分子溶于缓冲液中和感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。原核生物作为受体细胞原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常见原核细胞是大肠杆菌。
（2）重组细胞导入受体细胞后，筛选含基因表示载体受体细胞依据是标识基因是否表示。
4、目标基因检测和表示
检测转基因生物染色体DNA上是否插入了目标基因，方法是采取DNA分子杂交技术。
检测目标基因是否转录出mRNA，方法是采取用标识目标基因作探针和mRNA杂交。
检测目标基因是否翻译成蛋白质，提取蛋白质，用对应抗体进行抗原－抗体杂交。
有时还需进行个体生物学水平判定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。
三、蛋白质工程概念
蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其生物功效关系作为基础，经过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一个新蛋白质，以满足人类生产和生活需求。（基因工程在标准上只能生产自然界已存在蛋白质）
专题2 细胞工程
一、植物细胞工程
1、理论基础（原理）：植物细胞全能性
2、植物组织培养技术
（1）过程：离体