文档介绍：生理学试验手册
EXPERIMENT MANUAL FOR PHYSIOLOGY
专业及班级：
学 号：
姓 名：
组 别：
天津医科大学临床医学院生理学试验室
试验一 标本制备及BL-410生物机能试验系统使用
Experiment 1 Preparation of specimens and the use of BL-410 biological function of experimental system
同组人姓名（the name of the students in the same group）
。
日期（date）： 年 月 日
【试验目标】
掌握制备坐骨神经-腓肠肌标本操作技术，为以后相关神经肌肉试验打下基础；熟悉BL-410生物机能试验系统使用。
【试验原理】
蛙或两栖类动物部分基础生命活动及生理功效和温血动物近似，而且其离体组织需要生活条件很简单，易于控制和掌握。所以在生理学试验中，坐骨神经-腓肠肌标本是研究神经肌肉生理最常见对象，常常见来研究神经肌肉兴奋性、刺激和反应规律、肌肉收缩特点、兴奋性周期性改变等。
【试验器材和药品】
蛙类手术器械一套（金属探针1根，粗剪刀、眼科剪刀各1把，圆头镊子、眼科镊子各1把，玻璃分针2根），蛙板和玻璃板各1块，培养皿，滴管，废物缸、锌铜弓，丝线，棉花；任氏液。
【试验对象】
蟾蜍或蛙。
【试验方法和步骤】
1．破坏脑和脊髓（常见有三种方法）
(1) 俯式捣毁法：是最常见方法。以左手持蟾蜍，将其腹面朝向手心，前肢夹在食指和中指之间固定，后肢夹在无名指和小指之间固定，并用拇指按压蟾蜍头部使之下俯30~40度角；然后右手持金属探针沿蟾蜍头部中线下划，可触及一凹陷处即为枕骨大孔。将探针从枕骨大孔垂直刺入1~，再向前刺入颅腔，左右搅动（可感觉到探针和颅骨壁碰击），破坏脑组织；再将探针退回至进针处，但不拔出而是转向后方刺入椎管，破坏脊髓。
(2) 仰式捣毁法：将蟾蜍仰卧于蛙板上，拉开下颌，右手持探针在颅底两眼之间向前下刺入颅腔，用探针在颅腔内向四面捣毁脑组织，然后将探针退至粘膜下，针尖向后平行刺入椎管内以破坏脊髓。
(3) 横断脊柱后捣毁法：左手持蟾蜍，右手持粗剪刀，在两腋窝稍下横断脊柱，然后在脊柱呈白色脊髓断面处，向上插入探针破坏脑，再向下插入探针破坏脊髓。
以上方法破坏脑和脊髓成功后，蟾蜍出现四肢（尤其是后肢）瘫软，并常有尿失禁现象。
Schematics for handing of toad
2．剪去躯干上部及内脏 用粗剪刀在两侧腋部稍下（ ~ 2cm处）剪断脊柱，用左手握住蟾蜍后肢，拇指按压骶骨，使蟾蜍头部及内脏自然下垂；避开腰骶神经丛后，右手用粗剪刀沿脊柱两侧剪开腹壁，在耻骨联合处将躯干上部及内脏剪掉，弃入废物缸内。
3．剥皮 左手持大镊子夹住脊柱断端 (小心勿伤神经)，右手捏住脊柱断端皮肤边缘，逐步向下剥去全部后肢皮肤。将剥好标本放置在盛有任氏液培养皿中，或置于洁净玻璃板上，滴加任氏液备用。然后洗手并清洗用过手术器械。
4．分离左右腿 用圆头镊子夹住脊柱并提起，避开坐骨神经，用粗剪刀剪去向上突出骶骨，沿脊柱正中线将脊柱从上向下分成两半，再从耻骨联合中央剪开（注意：剪开时应避免剪刀走“S”形，以确保坐骨神经完整），将已分离两腿浸入任氏液备用。亦可在游离大腿部位坐骨神经后再分离两腿。
5．游离坐骨神经 取蟾蜍腿一条，用玻璃分针在大腿后面内侧沿坐骨神经沟（股二头肌和半膜肌之间）分离肌肉，暴露坐骨神经。向上将梨状肌及其周围结缔组织剪断，然后用玻璃分针沿脊柱自上而下轻柔游离坐骨神经腹腔部（坐骨神经呈亮白色束状），用眼科剪刀剪断神经全部分支，在近脊柱处穿线结扎，从脊柱根部将坐骨神经剪断。也能够不结扎、不剪断神经，而保留一小块和神经相连脊柱（×），供握持神经用。
6．游离股骨 将游离坐骨神经轻轻搭在腓肠肌上，切断膝关节周围大腿部肌肉，把股骨刮洁净，然后剪去股骨小头并保留余下股骨（约1~），方便在固定神经肌肉标本时使用。
7．完成标本 用眼科镊子（或小剪刀）在跟健下方穿一洞，向上游离腓肠肌至膝关节处。穿线