文档介绍：厦门大学
博士后学位论文
兰花生殖生物学研究——雄配子体发育观察及精细胞、胚囊、
合子、胚分离操作
姓名:伍成厚
申请学位级别:博士后
专业:植物学
指导教师:田惠桥
20081101
内容摘要本文以五唇兰、蝴蝶兰为材料,应用石蜡切片和花粉压片观察了掷蓟ㄐ叟渥犹宓姆⒂辛司赴姆掷耄辉诜掷肷钆吣业基础上,进行了卵细胞、合子和多细胞胚的分离研究。本文的主要结论是:宕嚼肌⒑嫉男℃咦铀姆痔寰兴拿嫣逍汀⒆笥叶猿菩巍交叉形和蔚榷嘀掷嘈停欠⒂伤暮匣ǚ郏⒂伤暮匣ǚ劬奂成花粉块。花粉成熟时为二细胞型。ü斯な诜凼够ǚ酃茉谧臃磕诜⒂倮没ǚ酃茉诟事洞中直接爆破分离出五唇兰、蝴蝶兰的精细胞,成对的鼍赴谔积大小、荧光强弱均显示有较大差异。应用显微操作仪可收集精细胞群体。τ妹附庖徽竦捶ù砼咧椋掷氤种兰花的生活胚囊,继之以显微解剖分离出掷蓟ǖ暮献雍拖盗性撸种兰花卵细胞均未分离出来。掷氤墒炫咴虿恍枰C附猓鲇媒馄史ḿ纯伞关键词:兰花;精细胞;胚囊;合子;胚;分离操作
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玉米素转移星期英文缩写词表
声明人┟:勿威厚厦门大学学位论文原创性声明研究成果。本人在论文写作中参考其他个人或集体已经发表范和《厦门大学研究生学术活动规范孕》。本人呈交的学位论文是本人在导师指导下,独立完成的的研究成果,均在文中以适当方式明确标明,并符合法律规另外,该学位论文为课题的研究成果,获得翁组经费或实验室的资助,在笛槭彝瓿伞朐谝陨侠ê拍谔钚纯翁饣蚩翁庾楦涸鹑嘶蚴笛槭颐疲未有此项声明内容的,可以不作特别声明。聀日
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,由于是深藏在配子体内进行的,至今对其机理的认识还非常有限。离体受精技术是利用分离方法,将雌、雄配子置于离体控制条件下研究受精机理,可以排除体细胞组织的干扰,是目前植物生殖生物学最活跃的研究方向之一,不断有综述文章从不同角度总结这方面的研究成果‘卜¨】。植物离体受精包括三项技术基础,即配子分离、单对配子融合与人工合子的培养,这三个方面近年来都取得了丰富的研究成果。经过多年的发展,离体受精已经成为探索和利用被子植物有性生殖的一个技术平台,在研究精卵细胞的发育、配子识别、合子激活、进行远缘杂交以及结合基因工程技术开展植物育种等方面都具有独特的应用价值。与动物和低等植物不同,被子植物的精细胞需要从花粉粒或花粉管中获取。被子植物的花粉有两种类型:三细胞花粉和二细胞花粉。三细胞花粉成熟时已经形成精子,可以由花粉粒中将精子分离出来。二细胞花粉在成熟时仅含生殖细胞和营养细胞,在花粉管萌发后生殖细胞进行分裂才形成精细胞,只能从花粉管获得精细胞。三细胞花粉精细胞分离的方法主要是研磨法和渗透压冲击法,迄今已从数十种三细胞花粉植物的花粉中分离出了精细胞【,Q心第一章绪论
获得精细胞外,叶祖云掣】应用花粉培养出花粉管再将花粉管进行爆莫永胜等嗍改良了原有的渗透压冲击法和研磨法,从紫菜苔法,是将悬浮于一定介质中的花粉用玻璃匀浆器或其他装置轻轻研磨,使花粉壁破裂而释放精子。玉米、油菜⒎侵蘧俊⒉げ【仍么朔ǔ晒Ψ掷氤鼍赴U庖环椒ㄊ中虮悖惶览于花粉的成熟度与生理状况,但研磨时需要手工技巧,研磨后的花粉壁碎片较难除去【】。渗透压冲击,是将花粉置于适宜的渗透压条件下,任其吸水后自行破裂。白花丹、玉米【’。水稻⒑诼【】等数十种三细胞花粉的精细胞分离采用这种方法都获得成功【俊U庵址椒ń仙偎鹕精子,花粉壁较易过滤除去,但花粉的种类、发育时期、生理状况等因素对渗透压冲击的效果影蟆俊畃花粉粒中分离出大量生活精细胞,生活精细胞的分离率分别达到%和%,应用改良研磨法分离的精细胞在娴臀孪伦畛た纱婊钜恢堋太子参除通过花粉直接爆破破也可获得成对的精细胞,%的欣谄浠ǚ鄣拿确