文档介绍：普通生物学实验内容
★实验
显微镜的构造和使用方法
★实验二显微镜临时装片方法以及
微生物标本长度的测量
★实验三生物绘图技术
★实验四真核细胞结构观察
★实验五蛋白质沉淀反应
★实验六血型的测定
实验一显微镜的构造和使用方法
实验目的
1、掌握一般光学显微镜的基本构造和功能。
学会正确使用显微镜及其保护方法。
二、实验材料和用品
实验材料:植物花粉或花瓣
2、实验器材及用品:生物显微镜;载玻片;盖玻片;镊子;滴
管;吸水纸;擦镜纸;二甲苯。
三、一般光学显微镜的结构
机械部分:用来装置与调节光学部分。包括以下部件
①镜座:用以稳定和支持显微镜
②镜柱:镜座上的短柱,联系于镜座与镜臂之间,用以支持
显微镜的其他部分。
③镜臂:它有支撑镜筒、载物台、照明装置以及调节焦距装
置等作用。
④镜筒:视线通过之圆筒。上端为接目镜、下端为旋转器。
旋转器上有2-4个接物镜。
⑤调节器:一般安装在镜筒后方的两侧,有粗细两种调节
器,调节焦距之用。粗调节器可使镜筒作较大幅
度升降。细调节器作比较精细的调节,能缓缓地控
制镜筒升降
⑥转换器:一般都装在镜筒下方,由两个金属圆盘叠合组成,
上有2-4个孔,可依接物镜放大倍数高低,顺序安
装3-4个接物镜。转动转换器,可更换不同放大倍
数的接物镜。
⑦载物台:为放置标本的平台。位于镜筒的下方,中央有
孔,为光线通路,台上装有一对压片夹,用来固定
标本。有的载物台上装有标本移动器,既可固定标
本,又可前后左右移动标本。标本移动器上有标
尺,用以寻找物象。
以上部件见图1-1。D
2、光学部分:包括产生物像的光学系统和照明光学系统两部分。
①接目镜:装在镜筒上端,有5×、8×、10×、15×等不
同放大倍数,根据需要选择一个接目镜插入镜
筒中使用。
②接物镜:一台显微镜常有2-4个接物镜,分低倍(10×)
高倍镜(45×或40×)和油镜(90×或
100×)。、、
,这些标记的数字越大,其放大率
越高。显微镜的总放大倍数是接目镜的放大倍
数与接物镜的放大倍数的相乘积
③聚光器和光圈:装置在载物台下面。聚光器是由一组聚
光透镜组成,其作用是聚焦反光镜所反
射的光线于观察物上,光圈位于聚光器
下方,由多个金属页片组合而成,有一小
柄控制。推移小柄,可使光圈孔径缩小
或放大,藉以调节入射光量,使照明调
到最适程度。
④反光镜:在聚光器下面,由一平面镜和一凹面镜组成,
它是把光源射来的光线反射向上,使穿过聚光
器,照明标本
四、光学显微镜的成像原理
显微镜的放大作用是通过透镜来完成的,单透镜成像具有像差
和色差,影响物像质量。由单透镜组合而成的透镜组相当于一个凸
透镜,放大作用更好,可消除或部分消除像差和色差。图12是显
微镜的成像原理模式。A"B"和眼睛的距离为显微镜的明视距离,
标本AB的像经过L0(物镜)后到AB处成为一个放大倒立的实像
(中间像),F为L0的后焦点。当光线传到Le(目镜)时,在
A'B"处,AB'被放大成一个直立的虚像,然后传递到视网膜
A"B"上,标本AB就被放大了,人眼看到的是AB被放大后的虚像
A"B"与原样品像的方向是相反的。见图1-2
五、显微镜的性能
显微镜分辨能力的高低决定于光学系统各部件的质量。物像放
大后,能否呈现清晰的细微结构,主要取决于物镜性能,其次为目
镜和聚光器的性能。
、数值孔径:
也叫做镜口率(或开口率),简写为NA,在物镜和聚光器上都
标有它们的数值孔径,数值孔径是物镜和聚光器的主要参数,也是
判断它们性能的重要指标。数值孔径和显微镜的光学性能有密切的
关系,它与显微镜的分辨率成正比,与焦深成反比,与镜像亮度的
平方根成正比。
数值孔径可用下式表示
NA=n sin
式中:n-物镜与标本之间的介质折射率;a-物镜的镜口角
见图13。
分辨率
分辨率是指分辨物像细微结构的能力。分辨率常用可分辨出的
物像两点间的最短距离(D)表示,而D又和二分之一波长()及
物镜的数值孔径有关。因为光波只能对其波长较长的物体造像,若
某个物体小于二分之一波长,光线可绕过该物体,不能造像。
D可用下式计算:
可见光的波长为04-,。若用数值孔
,则D=(2×)=,这表示被检
,。如果
使用数值孔径为125的物镜,则D=。凡被检物体长度大