文档介绍：圳≥年日沉默蚨匀松嗔郯┫:广东省国际合作项目南方医科大学级硕士学位论文產
生物学行为的影响沉默蚨匀松嗔郯┫:杨静指导教师:曾曙光教授摘要提高舌鳞癌患者的生存率和生存质量依然是一个世界性的难题,因此,十分有必要探寻更加安全有效的治疗方法来辅助加以破解。目前除了探索舌鳞癌早期舌鳞状细胞癌是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤,近年发病率呈上升及年轻化的趋势,目前以手术为主,放疗化疗为辅的综合治疗对舌鳞癌患者晟率没有明显的提高,仍徘徊在%左右,中晚期患者的晟媛矢停绾发现的有效手段外,通过基因靶向治疗控制舌鳞癌的生长,增殖,侵袭和转移成为提高舌鳞癌五年生存率的有效策略,必将为最终控制舌鳞癌提供新的方法,因而,也成为当今舌鳞癌治疗领域研究的热点问题。甘窍赴诘闹匾;颍胂赴婊詈团咛シ⒂,由虮嗦耄扇磐揪吨械墓丶榉郑饕4嬖谟谙赴手校谛「扇臨瑂臀⑿琺牟讨衅鹱重要的作用【⒂肫涿盖胁飐癿捌渌鞍赘春衔镌诙嘀生物过程中起调节作用,包括细胞增殖、分化、凋亡、侵袭迁移及死亡等等。其中隦干扰有关,是机体的一种关键的抗病毒机制。是一类大小约谋J胤潜嗦隦,它通过促进到饣蛘咭种品肜调控靶基因的表达。近年来的研究发现在多种肿瘤中异常表达,并且这些基因在一定意义上作为潜在的癌基因或抑癌基因参与了肿瘤的发生发展过硕士学位论文
.隻.】:在乳腺的肿瘤中隤和取S捎贒导致癌基因激活;当胍职┗蛳嗷プ饔檬保浔泶锪可系鳎贾乱癌基因失活【伞俊2煌闹琢鲋衜谋泶锲赘谋洳煌绮糠謒同的肿瘤中表达也不同,在某些肿瘤中,副泶锵碌鳎诹硪恍┲琢程,在肿瘤的发生过程中,当与癌基因相互作用时,其表达量下调,达上调,部分表达下调,但是,在人类的大部分肿瘤中的表达普遍降低【,而这种降低在肿瘤的发展过程中是起主导作用,还是仅仅反映了肿瘤的未分化状态,还不是很清楚。作为的加工酶,傅脑诓中,傅谋泶锶瓷系鳎魑猰纳嫌蔚骺仄鳎珼表达的变化可能会通过改变了的表达谱而影响肿瘤的生物学行为。许多证据表明这些能够调节扛谋涞墓δ苄曰蛴肴死嘀琢龅姆⑸泄兀篛诜尾康姆小细胞肺癌中与,在慢性淋巴细胞白血病中、酶既是正常机体运作中的关键基因,其表达的变化又与肿瘤的发生发展紧密联系,正是刚庵肿饔玫牟蝗范ㄐ浴浚寡芯空呒喊阉魑猂干扰治疗的重点进行研究。年¨仁状伪ǖ繢与人类肿瘤的相关性,他们研究发现诜切∠赴伟┲械谋泶锵碌鳎⒚魅菲浔泶镉肓俅膊±硖卣及预后密切相关。之后越来越多的学者着手研究赣胫琢鲋涞南喙匦裕现更有学者通过体外干扰虻谋泶镆匝橹酶在肿瘤发生发展中的作用,而在舌鳞癌细胞中傅谋泶锛捌渥饔蒙胁磺宄R虼耍狙芯客过体外靶向沉默人舌鳞癌细胞赴蠨基因的表达,进一步观察细胞的体外增殖,细胞周期,粘附、侵袭及迁移等生物学行为的变化,以探讨富虺聊灾琢龇⑸⒄怪兴鸬淖饔茫Q扒罂刂粕嗔郯┑姆⑸⒄提供新的靶点,并为将来进一步的研究提供实验基础。本研究包括以下三部分:中文摘要
┫赴械谋泶锛耙庖材料和方法:∪×街昵窒R颇芰Σ煌纳嗔郯┫:教諨在舌鳞癌细胞株中的表达及意义。并以正常口腔上皮细胞作为对照。τ妹庖呦赴旧ḿ际跫癢检测舌鳞癌细胞株细胞、.赴罢?谇簧掀は赴腄酶的蛋白质表达水平。细胞、.赴罢?谇簧掀は赴的傅膍谋泶锼健结果:庖呦赴旧ǚū砻鳎珼酶在正常口腔上皮细胞胞浆中的染色最深,┫?:瓺酶在舌鳞癌细胞株赴蚒细胞中的蛋白质水平与正常口腔上皮细胞相比表达下调。
第二部分舌鳞癌细胞赴逋庾H綝及干扰率检测目的:菇ǔ聊珼基因的细胞模型,将畇体外转染舌鳞癌细胞细胞,并观察转染率及检测干扰率。材料和方法:萸捌诮峁陨嗔郯┫,构建沉默基因的细胞模型,确定分组,采用脂质体介导法,用结果:凳倍縍庀允荆笛樽镈酶的水平下调,抑制率约3聊珼基因后检测舌鳞癌细胞细胞生物学行为变化的实验做准备。「扇牌蜠转染入赴捎糜ü獾怪显微镜观察荧光昙堑膕转染效率。凳倍縍觳庾H竞骉。细胞中傅膍泶锉浠庖呦赴旧ê蚖分析转染后赴蠨酶的蛋白质表达变化。ü獾怪孟晕⒕稻迪鹿鄄煜允緇浓度的昙莝转染情况良好。.ィ攵哉兆橄啾龋钜煊型臣蒲б庖。庖呦赴旧ǹ杉H綝后,细胞胞浆中的蛋白质染色与对照组相比明显变浅;检测显示实验组傅蛋白质表达下调,