文档介绍：第二军医大学
硕士学位论文
创新药物西那沙星与生物大分子的相互作用机制研究
姓名:费燕
申请学位级别:硕士
专业:药物分析学
指导教师:范国荣
20080501
学位论文作者签名:饪糍日期:坩年/月彩日如晗缭拢独创性声明学位论文版权使用授权声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明学位论文作者签名:本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定,第二军医大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷后适用本授权书日期:文年石月彳日的法律责任。日期:导师签名:
墒覃蛋白质、脱氧核糖核酸亲槌缮匾5纳锎蠓肿樱哂懈髯缘纳锕能,对一切生命现象都起着至关重要的作用。在分子水平上阐明这些生物大分子与小分子、离子,特别是药物分子的相互作用,是当前生命科学、俅惨窖А⒁┭Ъ盎等众多领域的重要研究课题,引起了许多学者的关注。,了解大分子结构与功能的关系,为生命科学研究提供有用的信息和数据,而且有助于认识药物药效作用的药理、启发与重要指导,其中以蛋白质为作用靶和以核酸为作用靶的药物设计正是目前药物光谱法尤其是荧光光谱法是研究生物大分子与小分子、离子相互作用的重要手小分子作用机理的研究中可以引入外源性荧光作为指示探针,也可利用大分子自身的内源性荧光作为探针鞍字手猩ò彼帷⒗野彼岷捅奖彼岬拇嬖冢蛊渚哂心谠从光W贤猓杉馄追ㄒ彩茄芯恳┪锓肿佑肷锓肿酉嗷プ饔没沓S玫募际酰蛭移或谱峰宽度变化。蛋白质中的某些芳香氨基酸如色氨酸、苯丙氨酸等在紫外区存在吸收峰,当所处的环境发生变化时,其紫外吸收光谱随之发生变化:吸收峰红移或者蓝移,吸光度及谱带亦有变化。肿佑捎诤屑罨诺乃菪峁梗浇τ星课眨筛菹嗷プ饔们昂驞或其靶向分子的吸收谱带的变化对二者相互作用模式进行判断。因此,利用光谱方法通过蛋白质和肿咏岷弦┪分子后结构上的变化来研究结合机理,是非常有效、简便且应用最广泛的方法。喹诺酮类药物以其高效、广谱、服用方便等优点在临床上发挥了越来越重要的作用。但是,因为仍存在一系列缺点,有关其药效作用机理、毒副作用等方面还需不断深入研究,开发高活性、低副作用的新型喹诺酮类药物也一直是研究热点。西那沙星是我国自主研发的第四代喹诺酮类抗感染新药,其作用机理是通过抑制细菌傩负廷舻幕钚裕佣种葡妇鶧的合成,导致细菌死亡。母核的位具有氮杂螺环结构,扩大了抗菌谱、增强了抗菌活性,尤其对盐酸环丙沙星耐药金葡球菌、表葡球菌、大肠埃希菌等抗菌活力强,且细胞毒性显著低于同类产品中的加—弧体外模型,了解结合的模式、程度、结合部位、结合力等问题,不仅有助于在分子层毒物毒性作用的毒理之微观机制,为药物分子的设计与筛选及新药的开发提供有益的化学和生命科学的前沿研究课题。此外,这方面研究的许多成果还应用于临床医学检验和生命科学中的生物大分子分离检测。段。荧光测试中的发射峰特征、能量转移捶⑸擞ü獾募忧炕蜮等指标可以对分子中荧光生色基团的结构及其所处的微环境提供有用的信息。在生物大分子与有机有些药物分子与生物大分子结合后,它们的吸收光谱会有一定的改变,出现吸收峰位创新药物西那沙星与生物大分子的相互作用机制研究。
以自发进行,丛均为正值、胡均为负值确定了西那沙星与牛血清白蛋白之间的主要猝灭常数‰减小;紫外光谱亦显示辗宸⑸嗣飨缘暮煲△入虼星紫外吸收峰位置并未出现明显红移,方程计算荧光猝灭常数妊随温方程,西那沙星对拟鹚俾食J洞笥诟骼噔鸺炼杂谏替沙星和左氧氟沙星,簧系募籽趸芴岣咂涔馕榷ㄐ裕跎俟饨獠锎吹牟涣反应,为临床抗感染治疗提供了新的选择。为了探讨西那沙星的生物体内作用机制,本论文研究了西那沙星与生物大分子的相互作用,主要包括以下两大部分:第一部分以牛血清白蛋白Q芯慷韵螅梦髂巧承嵌缘鞍字史肿拥挠ü具有猝灭作用这个特征,用荧光光谱和紫外光谱相结合的方法对胛髂巧承窍互作用的机理进行了探讨。西那沙星能使哪谠从ü。利用荧光猝灭ǖ故匠碳扑懔瞬煌露扔雙跫挛髂巧承怯隑之间的结合常数,基于非辐射能量转移理论分别将一定浓度挠ü夤馄资两者之间的结合距离湍芰孔R菩蔈。根据热力学参数由于,结合反应可作用力类型为静电作用力,采用同步荧光、三维荧光技术考察了西那沙星对象的影响