文档介绍：第二军医大学
硕士学位论文
胰岛-骨髓间充质干细胞联合移植治疗大鼠Ⅰ型糖尿病的研究
姓名:叶永峰
申请学位级别:硕士
专业:外科学(泌尿外)
指导教师:谭建明
20080501
英文缩略词表磷酸盐缓冲液胰岛一骨髓问充质干细胞联合移植治疗大鼠吞悄虿〉难芯缩写英文全称中文全称吖啶橙—骨髓间充质干细胞瓾疭液双硫腙胎牛血清碘丙啶胰岛当量链脲佐菌素吞悄虿’’猙.
签字日期:肼钼蹭日签字日物筛厂矿日导师虢珀彩学位论文作者签名:吖苹畔学位论文作者签名:计,五晦签字日期:弦口阵厂月穆独创性声明学位论文版权使用授权声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定,第二军医大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ
胰岛一骨髓间充质干细胞联合移植治疗大鼠吞悄虿〉难芯中文摘要第一部分:体外实验实验一大鼠胰岛的分离、培养及活性鉴定实验二大鼠骨髓间充质干细胞分离、,评价及鉴定胰岛的数量及功能。方法⒉捎玫ㄗ芄艽┐坦嘧⒔涸窹,芏忍荻壤胄姆ǚ掷氪笫笠鹊骸、采胰岛一骨髓间充质干细胞联合移植治疗大鼠吞悄虿〉难芯用旧ǎ珹狿ü馊旧ǚḿ捌咸烟谴碳な匝榧ㄒ鹊菏考肮δ堋结果大鼠胰岛呈不规则圆形,岛状,分离数量/鼠,直径,染色呈猩红色,纯度ィ鹊核卮碳ぶ甘。结论采用胆总管穿刺灌注胶原酶停現芏忍荻壤胄姆ǚ掷氪笫笠鹊杭虮阋行,所得胰岛得率及纯度高,活性正常。目的研究体外培养及扩增大鼠骨髓间充质干细胞的方法,并行功能鉴定。方法用完全培养液彻底冲洗骨髓腔,大鼠淋巴细胞分离液离心分离,取单个核细胞层体外以完全培养液贴壁培养至代,并进行成骨及成脂诱导。结果代—呈长梭形,单核,在含%的胎牛血清中能稳定的贴壁生长,经成骨诱导,可出现钙盐沉积,分化为成骨细胞,经成脂诱导,可分化为脂肪细胞。结论采用密度离心及贴壁筛选法可获得大量均一、纯度高的大鼠骨髓间充质干细胞。目的观察体外骨髓间充质干细胞是否具有延长胰岛存活时间的作用。
第二部分体内实验实验四建立吞悄虿〈笫竽P偷氖笛檠芯胰岛一骨髓间充质干细胞联合移植治疗大鼠吞悄虿方法分离大鼠骨髓间充质干细胞狹和胰岛,分共培养组×结论体外共培养条件下,—可延长胰岛的存活时间。方法健康大鼠只禁食婊治6哉占笆笛樽椋笛樽榘痥亮糖尿病建模成功率高,重复性好,可做为糖尿病动物模型用于人类吞悄虿〉氖笛第二军医大学硕士学位论文个—ザ琅嘌,予体外培养,检测胰岛的存活率和葡萄糖刺激的胰岛素分泌量。结果随体外培养时间的延长,胰岛与骨髓间充质干细胞混合培养组的存活率与胰岛单独培养组的存活率差异具统计学意义,媾嘌奔溲映ぃ鹊憾云咸烟欠应性逐渐减弱,刺激指数从第斓..∧P停兰燮湮榷ㄐ浴向大鼠腹腔内注入ヅǘ鹊腟,,对照组腹腔注射等量生理盐水。结果实验组一次建模成功大鼠唬周后随机血糖±/,体重.,±/,体重.,蛄..;=崧郏毫措遄艟赜盏即笫驣型研究。目的大鼠胰岛细胞联合骨髓间充质干细胞门静脉移植治疗吞悄虿〈笫螅鄄其疗效。方法只盏嫉奶悄虿笫笏婊治W閘/只鯞狹、组/只鯞/只⒆/只⒆×鯞狹只掷隨笫蠊撬杓涑渲矢上赴—鸵鹊海啪猜鍪渥⒁浦仓瘟扑淖榇
结果⒚啪猜龃┐淌渥⒎椒ㄒ淮未┐坛晒β%,±天..、±畂。各组之间差异终未降至正常范围内。结论:⒚啪猜龃┐淌渥⒁浦惨鹊河牍撬杓涑渲矢上赴ò胰岛一骨髓间充质千细胞联合移植治疗大鼠吞悄虿〉难芯鼠。观察大鼠的血糖变化。ィ质跗谒劳雎饰。⒆、组⒆,W樗拇笫笱L窃谑鹾焓庇幸欢淘菹蛳虏ǘ全,操作时间短,大鼠并发症少,存活率高。⒁鹊毫:螧狹浦部山档痛笫笱糖,与单独移植胰岛组相比,显著延长血糖降低时间。关键词:胰岛,移植,骨髓间充质干细胞,吞悄虿
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