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主要中英文对照凝血因子英文全称缩写中文部分凝血活酶时间醇氧化酶碱性磷酸酶抗凝血酶版纳微型猪近交系二硫键结合蛋白非洲绿猴肾成纤维细胞系中国仓鼠卵巢细胞细胞毒性馨拖赴巨细胞病毒地高辛弥漫性血管内凝血表皮生长因子溴化乙锭肝素结合位点人白细胞抗原一维等电聚焦脂多糖恒河猴主要组织相容性复合物主要组织相容性复合物类相关基因美国国立卫生研究院开放读码框多肽结合区外周血淋巴细胞植物凝集素纤溶酶原血小板四川大学博士学位论文’乙
胁英文全称缩写多聚腺苷酸聚合酶链反应中文凝血酶原凝血酶原时间快速末端扩增技术限制性酶切片段长度多态性技术反转录反应中心环猕猴自细胞抗原丝氨酸蛋白酶抑制剂猴免疫缺陷病毒猴空泡病毒亚板块筛选凝血弹性描记仪/凝血弹性测量法凝血酶组织因子途径抑制物莫罗尼氏鼠白血病病毒反转录酶蜃酵母氮源非翻译区四川大学博士学位论文/痚猺:瑀.
鼽囵声明、本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得四川大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明导下取得的,论文成果归四川大学所有,特此声明。申请人:并表示谢意。本学位论文成果是本人在四川大学读书期间在导师指指导教师:
恒河猴肝脏文库构建及部分凝血相关因子的遗传分子研究博士研究生谭卫东导师程惊秋教授指导卢晓风研究员陆燕蓉副研究员李胜富高级实验师中文摘要小组。恒河猴灵长类动物,广泛应用于生物医学研究的各个领域。随着移植科学的发展,,但由于猴与人仍然存在一定的进化差异,猪到猴异种移植的实验结果是否也同样真可能是超急性排斥引起的免疫损伤和供受者凝血系统分子不匹配,但具体是在进化亲缘关系上仅次于黑猩猩和人盼实反映了猪的异种器官组织在人体内的情况是非常值得关注的问题。动物模型研究发现凝血紊乱是目前阻碍异种移植的最大障碍之一,其主要原因机制还不清楚。因此,深入了解恒河猴凝血相关基因的特点和遗传背景,比较恒河猴凝血系统与人和猪的差异,有助于更加有效地建立动物模型,研究异种移植凝血紊乱的机制以及可能的防治措施,更准确地理解和应用恒河猴动物模型的实验结果,使安全有效的异种移植真正走向临床应用。文库的构建是分子生物学领域的一项重要技术,应用文库筛选和克隆新基因,是一条快速而有效的途径。但如何快速高效地建立高质量的文库,并从中获得有关目的基因的序列信息,需要具备一定的方法学基础。首先,我们分别使用靥搴四川大学博士学位论文
体构建版纳微型猪库中筛选凝血因子粜钥寺。⒘耸屎媳臼笛槭业膃目馍秆凝血系统中的大部分凝血因子均由肝脏合成,为了研究恒河猴凝血相关基因,我们使用达文库,初级文库的库容量为个克隆,扩增文库的滴度为能满足今后进一步研究的需要。恒河猴肝脏表达文库进行筛选,获得含恒河猴、、及蛋白质序列进行了初步分析,并通过与人、猪相应序列的同源性比对和蛋白模拟三维结构的比较,初步分析了恒河猴与人、猪凝血因子的相似性核酸序列相似性分别为.%、.%、.%和,外周血淋巴细胞文库,在此基础上对建库方法加以改进,建立了简便、快速和高质量的文库构建方法,成功构建了卧郼库。其次,我们使用褪删咴咏患际酰ü覤肝脏文方法。T靥宄晒菇撕愫雍锔卧郼个克隆/刈槁饰ァ目庵锌寺〉、,抗凝血酶珹是凝血、抗凝和纤溶系统中的重要因子。我们通过椒ǘ和騟难粜钥寺。俳岷’技术,获得、、虲四个基因的金长序列,分别为和,提交蠡竦眯蛄斜嗪欧直鹞#篍和。我们利用生物信息学方法对恒河猴、、虲核酸和可能存在的差异。结果显示:恒河猴、、虲与人相应基因比较,.%,氨基酸序列相似性分别为.%、.%、.%和.%;与猪相应基因比较,核酸序列相似性分别为.%、.%、.%和.%,氨基酸序列相似性分别为.%、.%、.%和.%。序列比对提示三个物种对应的凝血因子都有相同的结构域,所有的半胱氨四川大学博士学位论文
仍存在差异,如:糖基化位点、磷酸化位点和酶切位点等。猴、猪、人相这些凝血因子在三个物种间具有相似的生理功能和催化活性,但在一些特⒄婧讼赴泶镌靥錺痬及毕赤酵母重组表达载体法;成功构建了恒河猴肝脏表达文库;克隆得到了重要的凝血相关法初步比较了恒河猴凝血因子在基因序列和蛋白质空间结构上与人和猪关键词:恒河猴,凝血因子,文库,全长,生物信息学,体酸位点在