文档介绍:东北林业大学
硕士学位论文
白桦愈伤组织再生系统的体细胞无性系变异研究
姓名:郝爱平
申请学位级别:硕士
专业:林木遗传育种
指导教师:詹亚光
20050601
摘要%蔗糖是诱导白桦愈伤组织繁殖的最优培养数目均发生不同程度的变异,随着浓度的增加,再生植株二倍体细胞比例由逐晟屏耸屎嫌谧澡胱蹹多态性分析的技术,筛选出适合于白桦分析的本文以白桦鲇帕嘉扌韵滴Q芯坎牧希∫镀魑M庵蔡澹附加不同浓度的作为培养基,对白桦愈伤组织再生途径的快繁系统进行了研究;同时对愈伤组织及其再生植株的染色体数目变异进行了研究,对基因组湟旖辛分析,结果如下:秆〕鯥~.疞基,诱导率达到%以上:诱导产生的愈伤组织,在.%蔗糖分化培养基中出芽率高达%以上。⒘税阻胍镀苯映鲅康脑偕低常杭丛贗~./.疞蔗糖诱导天,%蔗糖分化培养基中培养天能达到直接出芽,每片叶片的丛生芽多达~个,质量较高。逑赴扌韵档娜旧迨勘湟炷J剑豪肂盏嫉挠俗橹捌湓偕仓甑娜旧渐下降到.%;由/盏嫉挠俗橹偕仓暧攵哉障啾热旧迨勘湟旖小,变异率为.%;另外,随着继代培养时间的增加,再生植株二倍体细胞比例由缂醯ァ逑赴扌韵档腄水平变异模式:随着浓度的提高,再生植株的嗵云段的比例明显提高,由低浓度时的.%上升到高浓度时的.%;继代次的再生植株多态性片段比例依次为.%、.%、.%、.%和.%,这表明随着继代次数的增加,再生植株的嗵云伪壤鸾ド仙湟熘鸾ゼ哟蟆ü赴Ч鄄旌虳水平分析,确定高浓度激素和继代次数的增加是导致白桦体细胞无性系变异产生的重要原因。对引物组合。〕鯥/.%蔗糖是使自桦快速繁殖,再生植株变异较小的培养基,其再生植株继代培养应控制在阅凇⒘税阻胗俗橹旧逯破际酰杭慈∨~,固定后用。谑椅隆解离~蚴椅孪掠%纤维素酶和果胶酶混合液酶解蛊笠谆竦梅稚ⅰ⑷旧Ч玫南赴至阎衅谌旧逋象。醪浇⒘税阻胗俗橹в毡浼际酰涸诟吲ǘ菶短时间处理和低浓度な间处理条件下可获得到叶柄、叶片愈伤组织的半致死剂量:通过观察半致死剂量下愈伤组织细胞的染色体数目发现,诱变后细胞中单倍体、非整倍体及多倍体细胞比例均显著高于对照,总变异率由诱变前。岣叩ィ馑得鱁对自桦愈伤组织的诱变作用是显著的。关键词白桦:愈伤组织;体细胞无性系变异:/%东北林业大学碟士学位论文
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把桦木组织培养概述白桦简介∞瘛馹馹自∞自自目目馡●美观,作为庭园树、行道树及街心绿地栽培,具独特的观赏价值,在冬季园林面貌、色彩单调的东北地区更显得珍贵。白桦与东北白桦属强阳性树种,喜光、耐寒、耐水湿,成年树的繁殖也获得了成功。国外的学者对白桦组织培养的研究较早,尤其在芬兰和日株。进入八十年代,芬兰和日本等国在桦树的快速繁殖技术上取得了突破性进展,繁殖植株,增殖倍数可达倍。此外,改进,芬兰的欧洲白桦组培技术已达到了工厂化水平。年春,芬兰的第一批自桦组培苗投入市场。进入九十年代,有关桦树的组织培养研究内容逐渐系统和深入化,欧洲理等方面也进行了探索其在“九五”期间白桦组织培养的研究取得了突破性的进展。我国的自桦大多数分白桦【”属于桦木科,桦木属,高~鼐洞;期路荩炱月份。东北三省均有分布,主要分布在东北地区的北部,产于大小兴安岭、完达山等林区。在东北的张广才岭、老爷岭等山区则以东北白桦为主。白桦与东北白桦是东北的乡土树种,姿态优美,树皮光滑洁白,小校红褐色,相映成趣,清雅生长迅速。由于它分布范围广,并有耐瘠寒、生长快、材质优良特点,所以是一个重要的工业用材树种。大径级自桦是单板、胶合板生产加工原料的首选材料,一度是航空胶合板面板不可替代的树种;同时又可做工艺材、家具材、纸浆材等,在餐饮业和医药业中也广为利用。为了扩大繁殖白桦优良品种和类型,保持其优良性状,急需解决白桦无性繁殖技术。随着组织培养技术在林业上的不断应用,利用组织培养技术获得再生植株成为快速繁殖白桦优良无性系的先进手段。桦树的组织培养起步于二十世纪五十年代,然而到七十年代后期才有较大的发展,本,桦树的组织培养得到了很大发展。年,芬兰的等首次报道了欧洲白桦的组织培养。他们通过畃的茎轴培养获得了桦树离体再生植株。此后,和在年对畃畇的茎端进行培养获得再生植系数可观。芬兰的运嘀μ醯囊秆亢投パ课M庵蔡褰⒘。日本的井出雄二【拷⒘擞靡秆俊⒅肿印叶柄、叶片及成年树晟ぞザ蔚韧庵蔡宕映醮嘌⒓檀嘌⒓檀鲋场⑸到移栽的一系列培养程序。其中用年生母树的叶柄、茎轴经四个月的培养获得完整ü,经过嫩枝增殖获得大量完整植株。到了八十年代末,桦树的组织培养技术大大白桦和日本白桦