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单克隆抗体G250修饰肿瘤细胞靶向基因载体研究.pdf

文档介绍

文档介绍:⑧尚翻大学单克隆抗体修饰的肿瘤细胞靶向基因载体研究硕士学位论文培养院系:专业:研究方向:作者:指导教师:生命科学学院生物化学与分子生物学酶工程及生物医学材料韩素芳孔德领教授南开大学生物活性材料教育部重点实验室二零零八年五月’
躲老韩糸考南开大学学位论文版权使用授权书寻萄、月印日Ⅻ经指导教师同意,本学位论文属于保密,在指导教师签名:学位论文作者签名:年解密后适用本授权书。解密时间:年月日本人完全了解南开大学关于收集、保存、使用学位论文的规定,同意如下各项内容:按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本;学校有权保存学位论文的印刷本和电子版,并采用影印、缩印、扫描、数字化或其它手段保存论文;学校有权提供目录检索以及提供本学位论文全文或者部分的阅览服务;学校有权按有关规定向国家有关部门或者机构送交论文的复印件和电子版;在不以赢利为目的的前提下,学校可以适当复制论文的部分或全部内容用于学术各密级的最长保密年限及书写格式规定如下:活动。
韩豪著南开大学学位论文原创性声明加晔痹碌笕本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师指导下,进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本学位论文的研究成果不包含任何他人创作的、已公开发表或者没有公开发表的作品的内容。对本论文所涉及的研究工作做出贡献的其他个人和集体,均己在文中以明确方式标明。本学位论文原创性声明的法律责任由本人承担。学位论文作者签名:
中文摘要在基因治疗中,非病毒载体因为具有安全性高、免疫原性低等优点日益得到重视,而解决靶向性是非病毒载体的重要研究内容。最常用的有效策略是以抗体和配体修饰非病毒载体,即将特定的抗体分子或配体分子与载体连接形成偶联体,从而使馨邢蛐缘刈5奖泶锾囟ǹ乖蚴芴宓南赴凇本研究以;蛟靥澹园┫赴弑泶锏腉乖魑0械悖獹单克隆抗体蚉偶联,构建了靶向非病毒基因载体,并进行一系列靶向转染实验。在此基础上,采用聚乙二醇园邢蛟靥褰行进一步修饰,改善其表面特性,提高非病毒基因载体在体内的基因转染效率。对小鼠腹腔注射杂交瘤细胞,制备腹水;通过辛酸一硫酸铵沉淀法和蛋白碇乔缀筒阄鲋姆椒ù炕疓,并经甈懊庖咦橹染色对抗体进行鉴定。隤或奘蔚腜偶联,偶联产物经过葡聚糖炕直鸬玫紾甈和甈.。进行了凝胶阻滞、附狻⒓す夤馍⑸涞仁笛椤6员泶颎乖纳霭┫赴⒐颈癌细胞和不表达抗原的肝癌细胞⑸霭┫赴血管平滑肌细胞辛嘶蜃H臼笛椤4送饣辜煅榱搜G迮ǘ榷曰转染效率的影响。分别采用流式细胞仪和化学发光检测仪测定基因转染效率。免疫组织化学染色结果表明纯化的哂薪岷匣钚裕梢杂氡泶抗原的肿瘤细胞特异性结合。.,粒径分布较窄。.鼼修饰,显著提高了载体的生物相容性。.訦赴淖H拘史直队赟和倍于固宥訮修饰前后对的转染效率提高叮許、淖H拘拭挥忻飨圆畋稹U馑得鱃的修饰使竦昧嘶转染的靶向性。当存在游离的保珿甈对的转染效率由.%下降为:%。游离的訥甈和H維没有明显影响。这证明了基因载体的靶向性是通过抗原与抗体作用所介导的。血清对基因转染效率有一定影响,随着血清浓度的增加,转染效率也有所下降。但是,
的转染效率仍显著高于其他细胞。总之,奘蜳使竦昧硕訦蜃H镜陌邢蛐裕琍修饰提高了谘G宕嬖谔跫碌淖;蛐剩佑欣谔迥诨蛑瘟啤关键词:聚乙烯亚胺;籔;肿瘤靶向;基因治疗中文摘要
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第一章前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯.第二章用于靶向基因治疗的单克隆抗体的制备⋯⋯⋯.目录第一节基因治疗概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第三节以聚乙烯亚胺为骨架的非病毒基因载体的构建⋯⋯⋯⋯⋯.第四节研究课题的提出及实验设计⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..第一节引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第二节材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第三节结果与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..;.
参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..第三章奘尉垡蚁┭前返暮铣杉捌湫阅苎芯俊第四章奘尉垡蚁┭前返暮铣杉捌渥H拘阅苎芯俊本章小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第一节引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第二节材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第三节结果与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..タ寺】】】