文档介绍：双向琼脂扩散试验
授课对象:临床医学专业八年制本科
授课教员:汤玉瑜
授课单位:第三军医大学基础部免疫学教研室
实验目的掌握双向琼脂扩散试验的原理
理解琼脂的制备方法
了解双向琼脂扩散实验的应用
教学重点琼脂的制备方法
双向琼脂扩散实验的原理
教学难点如何根据沉淀线判断抗原或抗体的浓度
使用教材
《免疫学实验》第一版朱道银吴玉章科学出版社2008
参考书
《免疫学》第四版龚非力科学岀版社2007
《 Med ical I mmuno logy》10th,. Pars low
推荐网站
医学免疫学网络教学/
美国国立生物技术信息中心
中国生物信息网
概述
临床免疫检验技术的出现最早可追溯至19世纪末。1896年
wida发现在伤寒杆菌中加入伤寒病菌人的血清可致伤寒
杄菌发生特异的凝集现象,利用这种凝集现象可有效的诊
断伤寒病,这就是最早用于病原体感染诊断的免疫凝集试
验,亦即著名的肥达试验( Widal test)
直擬凝集反应
x人Q
门凝集反应
毂倬颗粒可性阬原
间接凝集抑制反应
囉集反应
常见的免疫检验技术:
经典的免疫学反应
口凝集反应
口沉淀反应
口补体结合反应
口中和反应
免疫电泳技术
■免疫标记技术
口免疫荧光
口免疫酶技术
口放射免疫测定
抗原抗体反应( antigen- antibody reaction)是抗原与
相应抗体之间所发生的特异性结合反应。它既可发生在体
内,也可发生在体外。
体外的抗原抗体反应表现为沉淀、凝集、细胞溶解、
补体结合、中和反应等反应现象
兰德施泰纳,1868年-1943年,普林斯顿洛克
菲勒医学研究所,发现人的主要血型系统而获
1930年诺贝尔生理学或医学奖。他最初研究
化学,1896年後对血清学和免疫学产生兴趣,将
化学方法引入血清学研究,发现不同人的血清与
血细胞混合後可发生凝集反应,1901年用抗A血
清和抗B血清将血液分成A、B、C(後称O)三型
■沉淀反应( precipitation)是可溶性抗原与相应抗体在电
解质存在的条件下发生特异性结合所出现的沉淀现象。
可溶性抗原
相应抗体
沉淀线或沉淀环
■影响沉淀反应的主要因素
、抗体反应的浓度、比例
分类
对流免疫电泳
环状沉淀反应
沉淀反
双向扩散
琼脂扩散试验
单向扩散
电泳技术
絮状沉淀反应
火箭免疫电泳
Question:
怎样才能在无特殊仪器设备而又操作简便
的定性检测血清中各种免疫球蛋直、甲胎
蛋白、乙肝表面抗原等?
实验原理
可溶性抗原与相应抗体在含适量电解质的琼脂糖凝胶板
的对应孔中各自向四周自由扩若两者分子比例适当,则
在扩散的一定时间后在两孔之间相遇并生成白色沉淀线
Antibo
Antigen
●
°2
Agar matrix
Precipitate