文档介绍：第三章蛋白质的分离提纯及检测
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第一节引言
第二节前处理
第三节蛋白质的粗分离
第四节蛋白质的层析分离
第五节蛋白质的电泳分离
第六节蛋白质的结晶
第七节蛋白质的检测
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第一节引言
一、蛋白质的存在
蛋白质存在于所有的生物细胞中，是构成生物体最基本的结构物质和功能物质。
一般蛋白质，酶、抗体、激素蛋白、***蛋白等
存在部位
器官、组织、体液
胞内、胞外
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一、蛋白质的存在
存在形式
游离状态
消化液中的蛋白
结合状态
蛋白与蛋白
蛋白与非蛋白
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二、为什么要分离提纯蛋白质?
1、农业生产的需要
(1)对农副产品的综合利用需要高活性的酶制剂。
(2)用酶分析法测定家畜家禽以及农作物中某种物质的含量，需要用高纯度的酶制剂。
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二、为什么要分离提纯蛋白质?
2、工业生产的需要
食品、发酵、纺织、制革等工业，需要大量的高活性的酶制剂。
淀粉酶、蛋白酶、果胶酶、葡萄糖氧化酶、溶菌酶、葡萄糖异构酶
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二、为什么要分离提纯蛋白质?
3、医疗上的需要
人尿激酶治疗脑血栓
用猪心细胞色素C治疗脑震荡心力衰竭
用猪胰岛素治疗糖尿病
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二、为什么要分离提纯蛋白质?
4、蛋白质结构与功能研究及基因工程研究的需要
均一的蛋白制剂
工具酶
高纯度的标准蛋白
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三、对蛋白质分离提纯的要求
1、纯度
决定于研究的目的和应用上的要求
2、活性
要求蛋白质保持天然构象状态，有高度的生物活性
3、收率
收率越高越好
提纯步骤愈多，则损失愈大
作为均一制剂，一般收率在5-20％，最高可以达到50％左右。
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四、蛋白质分离提纯的一般程序
准备工作：
1、选材，处理；
2、建立适当的细胞破碎和蛋白质抽提方法；
3、建立一系列的分离提纯和浓缩的方法；
4、建立灵敏而方便的分析方法，以估计每一个分离提纯步骤的提纯倍数和收率；
5、建立鉴定纯度的方法(如：SDS聚丙烯酰***凝胶电泳、等电聚焦等)，以鉴定蛋白质制剂的纯度。
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