文档介绍：厦门大学
硕士学位论文
嗜酸氧化亚铁硫杆菌比较蛋白质组学研究
姓名:欧阳建平
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:陈新华
20081101
,它能氧化亚铁、硫和还原态的硫化物。甪菌是浸矿细菌研究的模式菌,对其亚铁氧化机制已经有大量研究,并发现了部分电子传递载体,如:亚铁氧化酶、铜蓝蛋白、细胞色素趸浮⑾赴谻、色素复合体等。并提出了多条亚铁氧化电子传递途径,但是这些电子传递途径都没有得到充分的证明,存在很多争议。硫氧化机制的研究进展比较缓慢,研究认为硫的氧化与的氧化还原存在偶联,可以作为电子受体使硫发生氧化,单质硫或还原态硫化物被氧化为亚硫酸后再进一步氧化为硫酸。在以单质硫为唯一能源,没有铁离子存在条件下,单质硫能被氧化利用。证明在嗜酸氧化亚铁硫杆菌中存在另一条单质硫氧化途径,这一途径不需要铁离子的参与。在存在多种可能与硫氧化和转运相关蛋白,但这些蛋白在细胞内的功能,及其参与的反应现在并不清楚。在浸矿过程中,随着的降低,矿物中的离子会不断溶解到甪茵生长的环境中,高浓度离子会抑制细菌的浸矿能力。目前该菌对高离子浓度抗性机制已有很多报道,有人认为对高浓度离子抗性的可能机制有一下几点。⒃诟呃胱浓度环境的选择压力下有利突变的不断积累导致抗性增强,但目前并没有具体实验证明。⒂腥巳衔U庵挚剐圆蚴茿.,菌内序列在基因组内插入突变导致该菌对高离子浓度抗性增强。⒘硪恢滞撇馊衔8镁圆煌胱涌剐杂胂菌内的质粒有关,虽然该细菌中存在多种质粒,但这些质粒与离子抗性的关系还没有得到证实。解决的问题,不仅对甪菌在生物冶矿方面的应用具有重要指导意义,而且对其它浸矿菌的研究也具有重要意义。本论文主要工作有以下两点:瓵.,菌以硫或亚铁为唯一能量来源培养条件下比较蛋白质组学研究通过双向电泳技术和技术对亚铁为唯一能量来源和硫为唯一能量来源培养的甪菌进行比较蛋白质组学分析,成功鉴定了个差异蛋白点,其中个蛋白点在硫氧化过程中上调,龅阆碌鳎缓笸ü齆厦门大学硕士学位论文
验证这些差异蛋白在讲钜臁2钜斓鞍装ǘ蚣乖福毫蜓趸沟鞍锥硫键还原酶、嘧啶核苷二硫键还原酶、异二硫键还原酶。分子伴侣蛋白:热激蛋白A虼幌喙氐鞍祝貉橇蛩峄乖浮腚装彼嵬蚜蛎浮?寡趸鞍祝。环四吡咯环合成重要酶:谷氨酰一还原酶。糖代谢相关蛋白:二磷酸果糖醛缩酶、涣姿崞咸烟撬嵬亚饷浮⒆6潜;浮6嘀治粗9δ艿鞍祝多种假定蛋白。从实验结果可以看出细胞内多条代谢途径与铁、硫氧化及铁、硫氧化环境适应性相关。荩Ь谡L跫潞透呃胱优ǘ忍跫卤冉系鞍字首檠а芯通过双向电泳技术和猅—V势准际醵哉L跫卵翘化培养和加有翘趸嘌尼埽斜冉系鞍字首檠Х治觯晒鉴定了霾钜斓鞍椎悖个蛋白点在高胱优ǘ忍跫系鳎个点下调。然后通录水平过验证这些差异蛋白在2钜欤⑾钟个蛋白在接胁钜臁诺鞍椎在讲钜觳幻飨浴U庑┎钜斓鞍字饕I婕疤谴换颍篏—桓事短峭阉浮涣姿岷颂且旃姑福缓塑账岷铣擅福毫姿岷颂墙沽姿峒っ福籄合成酶隑亚基;甲硫氨酰氨肽酶;磷酸乙醇酸磷酸酶;一个假定蛋白。其中狣一甘露糖脱水酶、涣姿岷颂且旃姑噶街置杆斡氲奶谴煌揪犊赡苡攵嗵堑暮铣捎泄兀推测彳.,菌对高离子浓度抗性可能与多糖的合成有关。关键词:嗜酸氧化亚铁硫杆菌、双向电泳、亚铁氧化、硫氧化、离子抗性厦门大学硕士学位论文摘要——,,
、.,.甌琭瑂,甌甌.
,..甪,.鮰猅——畁厦门大学硕士学位论文—,甌篜—、猟、、—,、,,篏—、
.、
缩写词简表英文缩写英文名称痠中文名称载体两性电解质双向电泳脱氧核糖核酸酶二硫苏糖醇乙二胺四乙酸固相化梯度千道尔顿基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱质谱光密度等电点肽质量指纹谱核糖核酸酶十二烷基磺酸钠嗜酸氧化亚铁硫杆菌三羟甲基氨基甲烷厦门大学硕士学位论文猟猅—甪
验室的资助,在骄的研究成果,获得箫硼年声明人┟:遮父陟断降第卿厦门大学学位论文原创性声明鲁錏填写课题或课题组负责人或实验室名称,未有此项声明内容的,可以本人呈交的学位论文是本人在导师指导下独立完成的研究成果。本人在论文写作中参考的其他个人或集体的研究成果,均在文中以明确方式标明,并符合法律规范和《厦门大学研究生学术活动规范行贰另外,该学位论文翁翁组鸦蚴笛槭彝瓿伞请在以上括号内不作特别声明。
声明人瑁禾O役真辏痳,月冲日厦门大学学位论文著作权使用声明槐C埽视蒙鲜鍪谌ā本人同意厦门大学根据《中华人民共和国学位条例暂行实施办法》等规定保留和使用此学位论文,并向主管部门或其指定机构送交学位论文ㄖ街拾婧偷缱影,允许学位论文进入厦门大学图书馆及其数据库被查阅、借阅。本人同意厦门大学将学位论文加