微生物学实验-细菌染色.ppt

文档介绍：细菌染色技术
基础生物学实验（三）
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目的要求
学****微生物涂片，染色的基本技术，掌握细菌的染色法。
初步认识细菌的形态特征。
巩固显微镜（油镜）的使用方法和无菌操作技术。
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微生物染色的染料
是一类苯环上带有发色基团和助色基团的有机化合物。
染料通常都是盐，分酸性染料和碱性染料两大类。
在微生物染色中，碱性染料较常用，如常用的美蓝（即亚甲蓝）、结晶紫、碱性紫复红、番红（即沙黄）、孔雀绿等都属于碱性染料。
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在中性、碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷；
而碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷；
带正电荷的碱性染料染色部分很容易与带负电荷细菌细胞结合使细菌染色。
微生物染色原理
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材 料
菌种
染色剂
仪器或其他用具：
显微镜
酒精灯
载玻片
接种环
香柏油
酒精+***
擦镜纸
生理盐水等。
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涂片
干燥
固定
染色
水洗
镜检
简单染色方法
干燥
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革兰氏染色
菌种:
参考菌：G+：Staphylococcus aureus,
G-: Escherichia coli
仪器 显微镜；
材料 载玻片，香柏油，二甲苯，擦镜纸，吸水纸，染色缸等。
染料 草酸铵结晶紫染色液，路哥氏(Lugol)碘液，95%乙醇，%番红染色液；
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革蓝氏阳性和阴性菌细胞壁成分比较
成分 占细胞壁干重的%
革蓝氏阳性菌 革蓝氏阴性菌
肽聚糖 含量很高（50-90） 含量很低（~10）
磷壁酸 含量较高（<50） 无
类脂质 一般无（ < 2） 含量较高（~20）
蛋白质 无 含量较高
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革蓝氏染色的意义
细菌分类鉴定
指导临床用药
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微生物分类鉴定的特征
形态学和生理生化特征
血清学实验和噬菌体分型
氨基酸序列和蛋白质分析
核酸碱基组成和序列分析
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