文档介绍：第三章 工具酶
基因工程使用的工具酶具有一个重要特征：每一种酶都具有自身特定的功能。有的像"手术刀"，可以进行DNA分子的特定切割；有的像"粘合剂"，可以促进DNA分子之间的粘合和连接；有的像"砌砖机"，可以合成完整的双链DNA分子。
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核糖核酸酶(Rnase)专门水解断裂RNA分子, 脱氧核糖核酸酶(DNase)特异水解断裂DNA分子 。
按水解断裂核酸分子的不同方式核酸酶分为两种类型：
核酸外切酶(exonuclease) :从核酸分子的末端开始，一个核苷酸一个核苷酸地消化降解多核苷酸链。
核酸内切酶(endonuclease):从核酸分子 内部切割磷酸二酯键使之断裂形成小片段。
核酸酶:通过切割相邻的两个核苷酸残基之间的磷酸二酯键，使核酸分子多核苷酸发生水解断裂的酶。
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常用的工具酶：
工具酶
限制性核酸内切酶
切割DNA
DNA连接酶
生成3′- 5′磷酸二酯键
DNA聚合酶Ⅰ
探针标记、补平3′末端
反转录酶
cDNA合成
多聚核苷酸激酶
5′磷酸化、探针标记
末端转移酶
3′末端多聚尾
碱性磷酸酶
切除末端磷酸基
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一把特殊的剪刀 _______限制性内切酶
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阿尔伯(Arber)、史密斯(Smith)和内森斯(Nathans)，获1978年诺贝尔生理学和医学奖
Lurva和Human（1952）以及Bertani和Weigle（1953）发现了λ噬菌体的限制作用，即在一种宿主细胞生长良好的λ噬菌体，但在另一种宿主细胞中生长很差。
修饰作用：第二个寄主菌株赋予λ噬菌体非遗传的变化，使之再感染时能够有效生长，而没有再次受到限制的现象。
限制作用和修饰作用都是由寄主控制，统称为寄主控制的限制与修饰现象。
第一节限制性内切酶Restriction Enzyme (RE)
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限制作用的本质是限制酶的切割反应，修饰作用的本质则是***化酶的***化作用。
Hsd R:编码限制酶；hsd M:编码***化酶；hsd S：表达产物协助上述两种酶识别特殊的作用位点。
当有DNA入侵细菌时，修饰酶修饰宿主自身的DNA，使之打上标记，避免自身的DNA被限制性内切酶分解；限制酶降解外来的DNA，自身DNA由于修饰酶的***化而受到保护。
限制性酶与DNA***化酶共同构成细菌的限制–修饰系统
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限制性内切酶是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并在识别位点或其附近切割DNA双链的核酸内切酶。
主要是从原核生物中分离纯化出来的。
据统计数字，仅Ⅱ型核酸内切限制酶一项迄今就已从各种不同的微生物当中，分离出了2300种以上、可识别230种不同的DNA序列。目前已经发现3500种以上，而且商业化的有250种之多．
第一节限制性内切酶Restriction Enzyme (RE)
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