文档介绍：南方医科大学
硕士学位论文
mCD99L2<'->A20细胞与T细胞对成瘤的影响及生物信息学分析
姓名:张弓
申请学位级别:硕士
专业:病理学与病理生理学
指导教师:赵彤
20090413
细胞与赴成瘤的影响及生物信息学分析硕士研究生:张弓指导教师:赵彤教授摘要研究背景性成分瓜疪,疪细胞只占肿瘤组织的极少部分恶性淋巴瘤是原发于淋巴系统的一组疾病,来源于馨拖赴琓淋巴细胞或自然杀伤细胞的非正常克隆性增殖,近年来随着、器官移植、肿瘤放化疗免疫抑制的应用,发病率急剧升高。淋巴瘤主要有霍奇金淋巴瘤,头腔羝娼鹆馨土两大类,两者有不同的病理和临床表现,其中经典型霍奇金淋巴瘤%以上,凶畔嗟倍捞氐牟±硖卣鳎涠,其余是大量以淋巴细胞为主的背景细胞,背景细胞以赴V鳎颊%。疪丛碆淋巴细胞,有报道其发生与基因表达缺失有关,本课题组前期将慢病毒柿WH灸谠葱詍基因表达阳性的鼠馨土鱿赴闍以筛选低表达虻寺≈晔狈⑾.,经过鉴定发现其的确具有疪赴谋硇停而钠は鲁闪雎式鲇%,成瘤率极低,所以构建类人动物模型陷入了困境。考虑到C庖呦低扯裥灾琢觯浞⑸牖迕庖呷毕萦凶琶切的关系,此外,疪赴纳嫘枰L厥獾拿庖呶⒒肪常绕涫潜尘癟淋巴细硕士学位论文,占赴蚼。赴直鸾又諦痗⑹螅珹组皮下成瘤率为%,
目的胞,因此接下来的研究通过改变小鼠的免疫状况来诱导其成瘤。本研究采取了小鼠全身放射的方式,以此来抑制其免疫功能,改变其赴侨悍植迹锏教高成瘤率的目的,进一步建立类人锬P痛蛳禄细胞因子参与了疪赴谔迥诘纳妗⒃鲋澈吞颖艿蛲龅墓獭/细胞周围的背景细胞大部分为赴琢鱿赴⒚挥斜籘细胞杀伤,相反得到了存胞同赴渫ü承┫赴蜃酉嗷プ饔玫靡怨采源擞T炝薍/细胞适宜的生存环境。那么究竟背景赴隿及疪赴涞墓叵等绾危壳暗难究只揭露出冰山一角,相关的文献报道比较少,研究方法也很局限,所以两者具体的相互作用机制至今尚未明确。本研究首先通过改变赴侨撼晒τ盏伎题组前期构建的类人疪赴‘赴鸅痗鼠成瘤,接下来采取了体外模拟疪赴奈⒒肪车姆绞嚼们捌诳翁庾楣菇ǖ睦嗳薍/细胞株细胞同其同源的/笮叵傧赴约捌⒃嘞赴餐嘌步探索疪赴芪П尘癟细胞之间的关系。此外,为进一步明确肿瘤细胞同微环境中赴南嗷プ饔没疲狙芯炕菇柚松镄畔⒀Х椒ǎ云诖哟罅ü派涞姆绞礁谋銪痗鼠体内赴切头植迹俳鴐一类人疪赴瓿闪觯=徊焦菇ɡ嗳薱动物模型打下基础。甿细胞同/∈笮叵傧赴约捌⒃嘞赴餐嘌谔外模拟疪赴隩淋巴细胞共生的微环境,探究赴雖‘胞之间的关系并观察两者共培养对体内成瘤的影响。柚镄畔⒀Х椒ɡ霉ü残酒葑试匆约跋喙厝砑蟹治觯较疪赴珺淋巴瘤细胞基因芯片表达数据差异,探究同疪赴芪П景馨拖赴叵得芮械南赴蜃雍颓骰蜃樱徊讲鱟微环境形成的机制。中文摘要疪赴牟渌盏嫉拿庖呶⒒肪趁芮邢喙兀ǖ老允究赡苡卸嘀活,据此推测馨拖赴谖諬/细胞存活当中起着至关重要的作用,肿瘤细的生物信息中探索疪赴尘癟细胞相互作用的网络关系。
子相关差异基因表达蛋白网络关系,并同前期课题组完成的细胞方法数士标准差辳硎尽A阶槌闪雎实谋冉喜捎昧礁龆懒⒀检验;两组成谋銽细胞亚群诱导赴鸅痗鼠成瘤将低表达虻膍细胞亚系经皮下接种/鼠,小鼠在接种前接受派洌鄄於锍闪鍪奔洹⒊闪雎省⑵は轮琢錾速度;取瘤组织做染色观察病理学形态;肿瘤组织进行原代培养,、谋壤甿细胞与馨拖赴餐嘌难芯嗳薍/细胞同/∈笮叵傧赴约捌⒃嘞赴餐养,倒置显微镜观察共培养后肿瘤细胞同淋巴细胞的形态;流式细胞仪检测共培养细胞、抗原表达;;芰Γ还才嘌赴种∈笃は拢鄄炱涑闪銮榭觯≡嗥髯鯤旧衅鄄觳±硌翁流式细胞仪检测小鼠外周血、的比例;觳夤才嘌赴上清液中猤虸的表达。酒萏骄縃/细胞同赴叵涤雖蛋白芯片比较分析以馨土鱿赴魑6哉眨肎谙呷砑虰—公共基因芯片数据库械腍/细胞以及馨土鱿赴蛐酒泶锸进行差异统计学分析,并对这些差异基因进行通道分析;生物学过程分析;在线分析细胞因和成瘤组织蛋白芯片差异比对;数据库对筛选出的差异基因进行文献挖掘,对差异细胞因子进行初步分析。
结果瘤时间的比较采用两样本煅椋辉谔逯琢錾で叩谋冉喜捎弥馗床饬糠讲罘析方法处理,若球形检验芫蛐渭煅椋肎瓽进行校正,采用校正后的岛蚉值;;两组胸腺重量的比较采用两样本煅椋籌和碳ち馨拖赴化实验结果数据采用单因素方差分析比较各组差异,两组间比较采用嘀比较法;觳夤才嘌赴锨逡篒—虸,鍪间点实验组和对照组的差异,实验结果数据采用析因设计的方差分析。谋銽细胞亚群诱导细胞/蟪闪。又趾蟪闪銮榭觯赴环派浜/∈个位点闪雎ィ衔创碜明显提高,差异