文档介绍：中国协和医科大学
博士学位论文
胚胎后亚全能干细胞生物学特征及其向造血细胞分化机制的研
究
姓名:房佰俊
申请学位级别:博士
专业:内科学
指导教师:赵春华
20040501
中文摘要在胚胎发育后的多种组织中都存在一类原始干细胞群体,它们和造血干细胞、神经干细胞等多能干细胞不同,后者只能分化为特定胚层的细胞,而这类原始干细为胚胎后亚全能干细胞,这类干细胞具有下列特性:可分化为不同胚层的细胞,分布于身体的所有组织和器官,具有相同的表型或标志;他们在胚胎期存在于一的这些特性无论是在于细胞参与组织损伤修复或是解决在实际应用中干细胞数量不足上都具有重要的意义。事实上,等的研究结果也提示在特定的组织物学而言,能够分离纯化、培养和有效利用胚胎后亚全能干细胞,无疑具有非常治疗一些遗传及退行性疾病。本研究的第一部分旨在研究胎儿体内多种组织中是否与骨髓一样,存在有胚胎后亚全能干细胞。通过运用、及免疫磁珠分选和极限稀释法,定向分化。在上述实验基础上,我们又相继从胎儿的心脏、肝脏、肺脏、鲈唷肌肉、真皮中分离到一千细胞亚群。免疫表型分析结果显示:、干细胞可塑性,即来源于某一组织的干细胞可以分化为其他组织类型的细胞,已经成为生命科学领域内一新的研究热点,但对于细胞可塑性机制的认识,学术界仍存在有较大的争泌。最近的研究提示成体组织中存在多能干细胞。我们认为胞可分化为不同胚层的组织细胞;另一方面,它们区别于胚胎干细胞,在妊娠期间会逐渐失去部分分化潜能,并且会出现一些特殊表型或者分子标志,我们称其些或全部的组织和器官中,可分化为不同类型的多能干细胞并在生长发育和新陈代谢中维持这些多能干细胞保持平衡;可以参与机体自我修复和更新,不仅能分化为所在器官的组织特异性细胞,参与器官重塑,也可以在炎症因子或者生长因子的趋化作用下,远处转移修复受损组织。显而易见,胚胎后亚全能干细胞具有中存在具有接近胚胎干细胞特性的这么一类干细胞亚群。因此,对于研究发育生重要的意义。另外,这一细胞亚群很可能成为组织工程中理想的种子细胞,用于从台骨髓中得到一疌亩嗄芨上赴侨海诘ハ赴缴希细胞体外可向脂肪细胞、成骨细胞、神经细胞、肝上皮样细胞及造血细胞煜中国协和医科大学中国医学科学院博士研究生学位论文
表达亦为阴性,、癈高表达。这些表型与胎儿骨髓源籆嗄芨上赴谋硇鸵恢拢蝗鹗弦患D啡旧ǹ杉佣喑裰竦为小时;体外可被定向诱导为在细胞形态及表型上与脂肪细胞、成骨细胞、神经细胞、肝上皮细胞一致的细胞。更为重要的是,,仍然保留有向三个胚层细胞分化的特性。因此,以上结果提示在人体的多种组织中确实存在有一类我们所称的胚胎后亚全能干细胞,其可能能够参与所在的或远处的组织或器官损伤后的再生与修复。髓源疌O赴哂懈叨鹊姆只蹦埽诰侵滤懒空丈涞姆欠逝中糖尿病及严重联合免疫缺陷/∈筇迥冢唤鲇兄谠煅V亟ǎ化为造血细胞,参与体内血管新生及微血管损伤的修复,还能分化为气管、肺、消化道的上皮细胞以及有功能的肝细胞。二次移植植入第二受体后,仍能够分化为造血、内皮、上皮和肝细胞,更进一步提示胎儿骨髓源‘细胞本论文的第三部分旨在进一步探讨能否从血管壁中分离到多能干细胞。我们的结果显示在胎儿的肺动脉管壁中存在有多角型或成纤维样、免疫表型与胎儿骨髓源瓹赴恢隆⒀9苣谄ぜ把9芷交∠赴砻姹曛疽跣缘囊类干/祖细胞,我们称其为‘细胞。在单细胞的水平上,该干/祖细胞体外能够在不同的诱导体系中分别定向分化为血管内皮及血管平滑肌细为阳性,内皮细胞的特征性表型霸煅O赴谋硇虲、均为阴性:另外,猭的干细胞,形态上基本与骨髓源疌嗄芨上赴嗨疲食上宋在对数生长期,细胞倍增时间也与骨髓源~多能下细胞一致,约在第二部分,我们研究了胎儿骨髓源一多能干细胞是否能作为组织工程中用的种子细胞,参与机体内多种组织的损伤修复。结果显示胎儿骨输属于一类种原始干细胞群体,很可能成为一种理想的种子细胞,可作为造血干细胞移植中煅8上赴奶娲芳坝糜谥瘟埔恍┮糯ḿ巴诵行约膊中国协和医科大学中国医学科学院博士研究生学位论文.
化的特定空间一的提法已为学术界所接受,但由于鉴别、操纵单个干细胞存在技胞,体内能高效参与血管新生及受损微血管的修复。另外,我们的实验亦证实该可能类似与骨髓源血管内皮及平滑肌祖细胞一样,参与了动脉粥样硬化的病理过“龛位”坏鹘谠煅N⒒肪持性煅8桑嫦赴晕腋隆⒃鲋场⒎术上的困难,使“龛位”成为一仅限于理论上的概念。直到最近,等人在体内实验中首次发现造骨细胞是造血“龛位”空间组成的重要调节成分,研究者们才对“龛位”有了一初步清晰的认识。在本论文的第四部分,我们借助体外造血发生模型,首次从另一个角度在体外证明了及等人的实验结果,并证明在造血“龛位”空间组成中,虰一窃煅7⑸闹匾5鹘谝蜃