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尿蛋白定性试验.doc

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尿蛋白定性试验.doc

上传人:精品小课件 2021/1/11 文件大小:23 KB

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尿蛋白定性试验.doc

文档介绍

文档介绍:目的
掌握尿蛋白定性试验的方法。
方法一 磺基水杨酸法
原理
在酸性条件下,磺基水杨酸的磺酸根阴离子与蛋白质氨基酸阳离子结合,形成不溶性蛋白盐沉淀。
器材
小试管或凹玻片。
试剂
200g/L磺基水杨酸溶液:磺基水杨酸200g溶于1000ml蒸馏水中。
标本来源
病人不同程度的蛋白尿标本。
尿蛋白定性结果判断
仍清澈透明
(-)
<
微混浊
(±)
~
明显白色混浊,但无颗粒
(+)
~
明显白色混浊且出现颗粒
(++)
~
明显白色混浊且有絮状沉淀
(+++)
~
严重混浊且有大凝块沉淀
(++++)
>
操作步骤
以试管法为例:
1、加尿液在2支试管中各加清晰尿液1ml(如为混浊尿标本,应离心后取上清液;碱性尿应加冰乙酸数滴,使尿液pH为5左右再试验)。
2、加试剂在1支试管中加磺基水杨酸2滴并混匀,1min时与另1支试管中空白尿液比较,判断结果。
3、判断结果见表。
报告方式
尿蛋白定性:阴性或阳性(磺基水杨酸法)
本法结果阳性,即可报告阳性。必要时可用加热乙酸法证实,并以加热乙酸法为准报告结果。
方法二 加热乙酸法
原理
加热煮沸使蛋白质变性凝固,加乙酸使尿pH接近蛋白质等电点(pH5左右)而加速蛋白质沉淀。
器材
中试管、木夹、酒精灯。
试剂
5%(V/V)冰乙酸溶液。
标本来源
病人不同程度的蛋白尿标本。
操作步骤
1、加尿液在试管中加清晰尿液至管高2/3处,混浊尿标本应离心后取上清液再试验。
2、煮沸尿液用木夹夹持(或手持)试管下1/3处,加热煮沸试管上1/3处内的尿液(注意:应不断转动试管均匀加热,防止尿液沸溅)。
3、观察结果将试管上部加热处尿液与试管下部未加热尿液比较;观察有无混浊变化。
4、加试剂 在试管中加入5%(v/v)冰乙酸2滴。
5、再煮沸尿液、立即观察结果,方法同步骤3。
6、结果判断和报告见表。
报告方式
尿蛋白定性:阴性或阳性(加热乙酸法)
方法三 干化学试带法
方法学评价
尿蛋白定性阳性有重要意义,通常筛检试验阳性时,应再用第二种尿蛋白检测方法加以确证。目前,尿蛋白质定性试验,最常用的是干化学试带法,磺基水扬酸法次之,加热乙酸法用于确证。
1、干化学试带法只对白蛋白敏感(70mg/L),对球蛋白不敏感,故不适用于肾病患者;但操作简便快速。
2、磺基水杨酸法与白、球蛋白等均起反应,敏感性高(50mg/L),为筛检试验之首选,但易出现假阳性。碱性尿时可出现假阳性;反应时间超过lmin,阳