文档介绍：河北医科大学
硕士学位论文
大鼠脂肪间充质干细胞诱导分化为血管内皮细胞的实验研究
姓名:李宇
申请学位级别:硕士
专业:外科学
指导教师:刘苏
20090301
出生后内皮祖细胞的主要来测。和骨髓一样,脂肪组织中大鼠脂肪间充质干细胞诱导分化为血管内皮细胞的实验研究摘要目的:随着经济的发展缺血性心脏病的患病率和死亡率也逐年提高,在一些较为发达的地区居民死亡的首位原因。缺血性心脏病的基本病理学改变在于局部心肌组织的血管狭窄闭塞,导致该处血液灌注减少甚至丧失在。常规治疗方法如经皮动脉腔内介入治疗和旁路移植术均只能解决内径难9艿牟”洌阅诰的血管和弥漫性病变及在无流出道而无法进行旁路手术的情况基本无能为力。并且经皮动脉腔内介入治疗和旁路移植术等目前治疗缺血性心肌病的重要手段,均可促进血管内皮细胞的凋亡和损伤引起δ苁У骱或峁顾鸷Γ偈血管受损后内膜增生性病变的形成和血管再狭窄的发生随着干细胞研究和细胞移植技术的发展,细胞移植疗法有望成为治疗心血管疾病的新策略。目前,脐带血和骨髓是也存在容易获取的间质细胞,脂肪组织由中胚层发育而来,研究表明中胚层的一些诱导因子参与胚体发育和造血分化E咛ジ上赴逋夥只芯恳脖砻髦信卟阆赴谀谄は赴发育过程中起重要作用】。年以来,国内外多名科研人员陆续发现,在脂肪组织中分离得到的基质血管成分中文摘要,—
琒】,脂肪组织源性基质细胞—俊R蛭K蔷硐殖隹稍谔逋獯罅坷┰龊投嘞形成单细胞悬浊液,按比例传代培养。选取生长良好的中,存在着一些与骨髓相似的具有多向分化能力的干细胞,分别命名为脂肪提取细胞赴恃9艹煞窒赴畍珹,脂肪源性中胚层干细胞,,根据国内外研究结果,将其统称为脂肪间充质干细胞本试验旨在研究体外定向诱导大鼠脂肪间充质干细胞蜓9苣谄は赴只那蹦苡胩跫A床心血管疾病的细胞疗法和血管组织工程学的研究及应用提供实验依据。方法:实验于年轮掠诤颖币娇拼笱Р理科实验室完成。笫笾炯涑渲矢上赴姆掷耄嘌疤逋庥盏采用密度梯度离心法从雄性芰浯笫笾咀橹中分离脂肪间充质干细胞并在/耆嘌褐薪行培养。观察其细胞形态及生长特性。在细胞生长至瓶底%融合时用ヒ鹊鞍酌簂消化,充分吹打第三代细胞,以血管内皮细胞生长因子、
对照组。蘸笙赴姆只观察诱导后细胞的形态及生长特性,:笫笾炯涑渲矢上赴姆掷耄嘌疤逋庥盏τ妹芏忍荻壤胄姆ǚ掷氲腁纯度较高,体外培养的均一性较好。赴又趾J继冢渑嘌扌璐碳ひ子。原代和传代细胞生长迅速,成漩涡样生长。ù赴涑稍残危ù又趾.∈碧冢后逐渐伸展开,形态主要为梭形。猯痬为诱导血管内皮细胞分化比较合适的浓度。允続诱导前表达为阴性,诱导后阳性表达。庖呦赴允続诱导前因子表达为阴性,诱导后部分细胞呈强阳性表达,部分弱阳性。:芏忍荻壤胄姆ㄊ且恢旨虻ィ行Х掷階的方中文摘要/法。
┪镒饔痬痬为诱导蜓管内皮细胞分化比较合适的浓度。逋馀嘌腁具有向血管内皮细胞分化的潜能,可以用于血管新生的细胞治疗。综上所述,本实验从大鼠脂肪间充质干细胞的分离,培养,体外诱导及诱导后的分化方面进行了研究,结果显示体外培养的哂邢蜓9苣谄は赴只那蹦埽橇俅细胞移植治疗心血管疾病一个值得关注的的新观点。但本实验仅就在对谔逋庥盏挤只Q9苣谄は赴辛初步探讨,还需要借助实验动物模型对其进行深入的研究和探讨。关键词:脂肪间充质干细胞;血管内皮细胞生长因子;中文摘要’
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