文档介绍：青岛大学
博士学位论文
siRNA介导的RNAi对肿瘤细胞CD59沉默作用的研究
姓名:石学香
申请学位级别:博士
专业:病原生物学
指导教师:高美华
20090602
軦介导的砧对肿瘤细胞沉默作用的研究关键词:;肿瘤;軦;凋亡;基因治疗摘要博士研究生石学香≡镅指导教师高美华教授目的观察榈嫉腞干扰州怨卑┫赴闔蠧因表达的影响以及裸鼠卵巢癌移植瘤的抑瘤效应,探讨在肿瘤细胞免疫逃逸及相关信号转导通路中的作用。方法设计并合成员嗦隒牡チ垂押塑账幔嘶鸷蠼垂押塑酸与线形表达载体连接构建成重组质粒,并以无关序列作为对照,脂质体法转染包装细胞系占《旧锨澹腥綡术赴琑甈和筛选出抑制效率最高的序列,荧光染料释放试验检测功能的改变;稳定转染卵巢癌细胞株⒁詓瓹作为对照,体外观察基因改变后对补体溶破的抵抗作用的变化;流式细胞仪测定活性的表达,立裸鼠移植瘤模型,动态观测移植瘤生长情况,计算肿瘤生长率,周处死裸鼠取部分移植瘤组织做免疫组织化学染色检测蛋白的表达。结果成功构建踔刈樵靥包括醵哉,发现其中...%和.%,.%和.%,.%和.%,差别有统计学意义。..轻,抑瘤率为.%;且组阳性染色细胞士飨陨儆趕瓹组,差别有统计学意义。结论榈嫉腞苡行б种艭虻谋泶铮⒛茉黾硬固褰榈嫉溶细胞活性及诱导细胞凋亡,抑制裸鼠体内卵巢癌移植瘤的生长,为后续进行肿瘤细胞的研究奠定了基础,可望为肿瘤的免疫治疗开辟新途径。旧ú舛ㄏ赴说母谋洌唤街致殉舶┫赴⑸.%..%.T趌::,煌固逑∈投认拢瑂蛃瓹染料释
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日期:渺耗阹月萑稿舞同期:叫年虑摺压夸·备日期:劫砷年期谕不保密阢学位论文独创性声明学位论文知识产权权属声明本人声明,所呈交的学位论文系本人在导师指导下独立完成的研究成果。文中学校享有以任何方式发表、复制、公开阅览、借阅以及申请专利等权利。本人离校学所有,未经许可,住何单位及任何个人不得擅自使用依法引用他人的成果,均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上己属于他人的任何形式的研究成果,也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。本人如违反上述声明,愿意承担由此引发的一切责任和后果。论文作者签名:本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品,知识产权归属学校。后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时,署名单位仍然为青岛大学。本学位论文属于:保密口,在年解密后适用于本声明。朐谝陨戏娇蚰诖颉导师签名:旧鞯陌嫒声明,
的过表达,提示与肿瘤的失控性生长和恶性转化密切相关州。肿瘤细胞引言也称保护素且恢忠蕴腔字<〈锚着于细胞膜表面的糖蛋白,ü氩固骞ツじ春衔内或的多聚化,阻止补体攻膜复合体的形成,保护宿主细胞免受补体的攻击【。是补体调节蛋白中作用于补体激活最后阶段的抑制性蛋白。另外,参与信号转导作用,与岷希斡肓说ズ讼赴粒细胞、血小板、赴幕罨赴5脊獭肿右斐S胍刮收蠓⑿运咝血红蛋白尿【⒁浦才懦夥从Α⑸鲈嗉膊『吞悄虿∮泄亍补体系统传统上被认为是机体抵抗微生物和感染的一道防线,大量研究表明,在许多的感染性疾病中,泶锛跎僖杂欣诨逶銮科洳固骞セ鞯那慷取F湓机体参与肿瘤免疫中的作用也越来越得到重视,机体对肿瘤的免疫包括细胞免疫和体液免疫,体液免疫中通过抗体依赖介导的细胞毒作用和补体依赖的细胞毒作用魑L逡好庖咧兄匾5目怪琢龌疲珻在调节补体攻击肿瘤细胞中起重要的作用,近年来随着对肿瘤免疫的研究,发现谥琢鎏颖苊庖吖セ髦起了非常重要的作用,经过大量的实验和观察表明在多种肿瘤表面高表达一种或多种补体调节蛋白,从而抑制补体对肿瘤的细胞溶解作用,使肿瘤逃避免疫攻击。近年来,国内外文献报道在多种肿瘤细胞中如宫颈、肠道、卵巢、前列腺癌等发现有高表达,抑制补体的杀伤作用,逃逸机体免疫监视,,有学者用流式细胞仪对肾癌中癌蛋白均高表达,又通过对人肾癌及兔肾癌的比较,发现蠧谋泶锔撸推测可能在肿瘤逃避补体攻击和炎症反应中起着最重要的作用【俊研究补体调节蛋白珻珻谋泶锸侵琢鱿赴颖艿タ寺】固刺激产生的补体依赖细胞毒性的一种策略。应用,抗体联合抗单克隆抗体诱导补体依赖性杀伤肿瘤细胞效果提高两倍,可望用于非何杰金淋巴瘤热艘惭芯糠⑾郑诙园┫赴闹瘟粕鄙酥校绻芰:嫌τ分子的抗体