文档介绍：中山大学
博士学位论文
肿瘤引流淋巴结内Tregs影响肝癌热消融小鼠免疫功能的研究
姓名:汪礼坤
申请学位级别:博士
专业:外科学
指导教师:彭宝岗
20100601
肿瘤引流淋巴结内跋旄伟┤认小鼠免疫功能的研究摘要专业:外科学博士生:汪礼坤师:彭宝岗教授导原发性肝癌是常见癌症,死亡率居国内恶性肿瘤第二位。目前手术切除、局部消融和肝移植是早期蟾涡灾瘟剖侄危手术切除后肿瘤旮捶⒙蚀笥ァ>植肯诹菩Э捎胧质跚谐噫敲溃淦消融己广泛应用于不能手术切除∪撕偷却我浦膊∪说牧俅仓瘟疲踩效,并发症低于%,然而,肿瘤消融后肝内复发率仍高达%~%。因此,迫切需要寻找新的途径治疗肝细胞癌复发。免疫治疗因其免疫特异性而具有广泛应用前景。目前庖咧瘟频姆椒ò括过继输入淋巴细胞、应用细胞因子吖,.虶瓹⒂τ贸实葑蕴逯瘤抗原多肽氖魍蛔聪赴⒂τ米蕴逯琢隹乖:螱瓹,.约爸琢鱿诮岷狭瞿谧⑸湎赴蜃踊菏臀⑶虻脑灰呙缫约せ罨迕庖叻应。这些措施临床应用表明可产生不同程度的免疫效应,影响肝癌病人的复发率和生存率。射频消融是通过电极周围的组织离子高速振荡、摩擦而产生高热,导致肿瘤组织凝固性坏死。肿瘤消融过程中释放大量的细胞碎片,并伴有局部明显的胞浸润。另外,热消融能诱导抗原特异性赴从ΑR蚨淦迪诓幕死肿瘤细胞有助于机体的免疫激活和肿瘤抗原的呈递,诱导机体发生肿瘤特异性细胞反应。临床研究表明射频消融治疗肝癌产生的局部变化能激活肿瘤特异性细胞反应,但这种效应不足以控制肿瘤复发,其机制目前尚不清楚。调节性赴琓且焕郈细胞,它中山大学博士专业学位论文肿瘤引流淋巴结内跋旄伟┤认谛∈竺庖吖δ艿难芯
不仅参与自身免疫性疾病、感染性疾病和移植耐受,而且通过抑制机体抗肿瘤免疫应答在肿瘤发生发展过程中发挥重要作用。研究表明∪酥琢鲎橹屯庵血中数量增加,参与姆⑸⒄构蹋跋霩病人生存率与预后。消除免疫抑制同时联合射频消融有望成为庖咧瘟频男路椒ǎü强机体肿瘤特异性赴且浞从σ郧宄痹谧R圃詈驮し栏捶ⅲ岣逪临床治疗疗效。肿瘤引流淋巴结琓侵苯游挥谥琢鱿掠蔚第一站引流淋巴结,在肿瘤免疫中具有关键作用。是肿瘤抗原和肿瘤源性树突状细胞紫冉氲亩读馨推鞴伲蚨衔猅侵琢隹乖状翁岢给先天免疫系统的生理位点,是决定机体免疫激活抑或免疫耐受的关键初始部位。目前研究显示荰诿庖吣褪茏刺闹匾R蛩亍本研究旨在探讨肿瘤引流淋巴结,勺局部免疫效应细胞的调节作用,进而影响肝癌热消融小鼠全身免疫状态的机制。中山大学博士专业学位论文肿瘤引流淋巴结内跋旄伟┤认谛∈竺庖吖δ艿难芯
第一节蟾蜗赴┲琢鲆髁馨徒崮P偷慕目的:建立肝癌肿瘤引流淋巴结—,P汀方法:细胞培养传代次后,收集细胞,每只小鼠右后肢足掌皮下接种,观察肿瘤生长和成瘤率,每隔饬恐琢龀ぞ丁=又趾蟮袢标本并称重。染色观察接种肿瘤和±硌氐恪结果:小鼠足掌皮下接种成瘤率为%,±硇院朔至眩诹馨拖赴┰觥结论:⑿∈蟾蜗赴㏕物模型。中山大学博士专业学位论文肿瘤引流淋巴结赥影响肝癌热消融小鼠免疫功能的研究
第二节鹘谛∈蟾伟┚植恳髁馨徒崦庖咝вο赴δ剩推⒃尸畂趋向于在诰奂瞧渌庵芰馨徒嵛坏恪目的:探讨肿瘤引流淋巴结琓内调节性赴琓跃植棵庖咝вο赴牡鹘谧饔谩方法:建立小鼠肝癌P停ü庖咦橹旧ê土魇较赴羌觳釺贔和及赴氖俊J凳倍縋测定表达水平。应用觳釺内赴置贗的功能。结果:内托вπ訲细胞均明显扩增,稚⒎植于赴居区。内表达水平显著高于同一接种肿瘤小鼠腹股沟淋巴结荷瘤小鼠的脾脏表达明显高于注射笃⒃唷抑制内已初始化的赴置贗唬墓δ埽璦瓹封闭激活后,赴分泌沟墓δ芸苫指础结论:内ü赴δ芏⒒又匾W饔茫宄齌是发挥特异性肿瘤免疫治疗的关键。中山大学博上专业学位论文肿瘤引流淋巴结猅影响肝癌热消融小鼠免疫功能的研究
.。飨蛴谠赥内聚集,而非其它外周淋巴结位点。第三节肿瘤引流淋巴结内跋旄伟┤认谛∈笃⒃郈赴δ目的:探讨肿瘤引流淋巴结琓诘鹘谛訲细胞琓愿伟┤认谛∈笕砻庖咦刺挠跋臁方法:建立小鼠肝癌透伟┤认谀P停ü庖咦橹旧ê土魇较胞仪检测推⒃嗄贔和乏赴氖俊J凳倍縋测定表达水平。应用觳釺和脾脏贑细胞分泌沟墓δ堋结果:赥和效应性赴飨岳┰觯琓弥散分布于赴居区。内表达水平显著高于同一接种肿瘤小鼠腹股沟淋巴结荷瘤小鼠肝癌热消融后跃奂疶,而蟹置腃细胞明显减少,同时脾脏内分泌沟腃细胞显著增加。结论:碩调控肝癌热消融小鼠脾脏内记忆赴δ芏⒒又匾作用,清除ǹ赡芴岣吒伟┎∪巳认诤笾琢鎏匾煨訲细胞记忆而控制肿瘤复发和转移。关键词:肝细胞癌;调节性赴恢琢鲆髁馨徒幔簧淦迪冢患且湫訲细胞中山火学博上专业学位论文肿瘤引流淋巴结跋旄伟┤认谛∈竺庖吖δ艿难芯
琭猣:猘篠瑆,,中山大学博士专业学位论文肿瘤引流淋巴结猅影响肝癌热消融小鼠免疫功能的研究