文档介绍：福建医科大学
硕士学位论文
缺氧对新生鼠脑细胞凋亡和神经再生的影响
姓名:李玉宇
申请学位级别:硕士
专业:人体解剖与组织胚胎学
指导教师:徐剑文;王玮
2010-09
缺氧对新生鼠脑细胞凋亡和神经再生的影响

中文摘要
【目的】
模拟新生儿出生窒息,建立新生大鼠缺氧模型,研究缺氧对新生鼠脑神经源
性分化因子(NeuroD)表达以及细胞凋亡和神经再生影响,为新生儿围产期窒息
所致的缺血缺氧性脑病的防治研究提供实验依据。
【方法】
Grojean 的方法,新生大鼠短暂置于 100%氮气环境中,建立出生窒息
的模型。采用神经行为学观察、HE 染色及透射电镜观察脑组织病理变化等方
法,对动物模型进行评价。
、缺氧 10min 组、缺氧 20min 组,采用冰冻切片的免疫
荧光、Western blot 检测 NeuroD 表达量的变化。
、缺氧 20min 组,一亚组分 13d、20d、27d 三个时间点
取材,采用冰冻切片的免疫荧光检测 NeuroD、石蜡切片的免疫组化检测 BrdU
表达的变化。另一亚组分 6d、20d 两个时间点,TUNEL 法检测细胞凋亡。
【结果】
、意识障碍等神经行为的异常。HE 染色可
见缺氧 10min 海马 CA1 区部分神经细胞肿胀,缺氧 20min 神经细胞的损伤加
重。超微结构显示缺氧 10min 出现神经元凋亡早期表现:核染色质边集,次
级溶酶体形成。微血管内皮细胞、周细胞发生空泡变性。缺氧 20min 后可见
神经元坏死,核溶解,细胞器模糊不清。微血管周围星胶细胞脚板、细胞突
起均肿胀。
,在大脑皮质区和海马齿状回可见 NeuroD 表达,Western
blot 分析也同样显示随缺氧时间的延长 NeuroD 的表达量明显增加(P<)。
,缺氧20min组13d、27d NeuroD/BrdU在海马CA1区/SVZ
的表达量均高于对照组(P﹤),且在20d表达量最高(P﹤)。TUNEL
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法检测出缺氧20min后6d在海马CA1区凋亡细胞阳性率明显高于对照组
(P﹤),而20d凋亡细胞阳性率与对照组比较无明显差异。
【结论】
100%氮气环境中的方法,可建立与人类新生儿缺血
缺氧性脑损伤相似的新生大鼠出生窒息 HIE 模型。
NeuroD 表达量的增加,表达部位主要在大脑皮质、海马、SVZ
等神经干/前体细胞聚集区。
,可诱导细胞增殖、神经元分化,触发神
经发生,对受损的脑组织进行代偿性修复和神经功能的重建。
【关键词】短暂缺氧 NeuroD 细胞凋亡神经发生

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Characterization of Apoptosis and Neurogensis Induced by
Transient Hypoxia in Postnatal Rat Brain
Abstract
Objective
A rat model mimicking neonatal hypoxic was established to investigate the
effects of transient hypoxia in brain on the expression level of NeuroD, apoptosis and
neurogensis. Importantly, this study may result in novel interventions for management
of hypoxic-ischemic encephalopathy.
Methods
1. The model was established as previously described by Grojean. Briefly, newborn
rats were transiently exposed to 100% N2, and reliability of the model was analyzed
by behavior analysis, HE staining and transmission electron microscope.
2.