文档介绍：华巾科技大学同济疾学院博士学位论文
修饰树突状细胞抗胃癌免疫功能调节的研究
中文摘要
利用基因修饰树突状细胞况来诱导机体抗肿瘤免疫己成
为肿瘤免疫治疗的一种重要途径。目前发现的肿瘤特异性的肿瘤抗原基因甚少,肿
瘤细胞自身提呈抗原效率非常低下,原因在于肿瘤细胞类分子往往低表达以
及共刺激分子缺乏,因此肿瘤特异性的十细胞的激活必须依赖于抗原提
呈细胞的帮助。
是功能最强、唯一能激活静息细胞的抗原提呈细胞,目前修饰主要方
法有①肿瘤抗原肤修饰的细胞性肿瘤抗原修饰的③肿瘤柑关抗原
基因导入
现己证明,以上方法,可诱导机体产生部分特异性,产生有限的免疫反应。
单纯用抗原肤修饰或细胞性肿瘤抗原修饰的存在有些问题生物活性不稳定,
易降解,冲击致敏后维持时间短暂,虽然将抗原肤修饰回输至机体后可诱导
出肿瘤有限的特异性免疫反应,但是大多数制性抗原多肤的半衰期仅为
小时,若要诱导出高水平的持久的抗肿瘤免疫反应需要反复多次体内回输此类
抗原多肤体外致敏的烦琐的步骤限制了在临床的使用,在这些方法中,基因
导入是最有效的,它能提供更有效的可供抗原识别的表位,转染的基因能长久的
表达,不受限制,所以,基因导入是目前修饰的主要方法和免疫治疗肿瘤
的方向。
蛋白是一种转录因子,它调控一些基因不同排列的表达,包括修复、生
长遏制、衰老和凋亡。目前研究表明肿瘤细胞中基因突变型的过表达是肿瘤细
胞重要的生物学特性胃癌是表达较高的肿瘤之一,肿瘤细胞基因的表达有其
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免疫原性同样可以激发了患者自身的抗肿瘤免疫功能。由于类分子肤结
合位点的多型性,若用某个突变的位点作为抗原,仅仅在特定的患者用特定的
寡肤刁‘能成功地产生反应,由于突变的多样性,这样的抗原制成的疫苗是
无法在临床上应用的。为克服上述问题,我们用全长野生型蛋白作为抗原,它与
大多数肿瘤中整个分子的过表达均相关,所以,野生型获得的抗原决定簇
可作为潜在的免疫原性,作为基因转染修饰后可以提呈经类途径刺激
肿瘤患者的细胞将引起特异性反应。
另外,小分子量肿瘤抗原肤修饰效果更好,但是小分子量的肤又较难被
等抗原提呈细胞摄取。热休克蛋白能结合小分子量的肤,对具有高亲和
力,我们将热休克蛋白和小分子量的肚结合,这样,可将小分子量的肤很好地
被提呈给肤复合物可以解决以上问题。
有鉴于此,本课题研究以下内容
第一部分胃癌组织中树突状细胞表型和功能的研究
第二部分胃癌患者外周血树突状细胞形态及功能的研究
第三部分修饰转基因的树突状细胞对胃癌的免疫功能调节的研究
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第一部分胃癌组织中树突状细胞表型和功能的研究
目的探讨树突状细胞表型抗原在胃癌及其癌前病变表达的意
义了解胃癌组织中细胞功能与胃癌的关系,。
方法用法免化技术和图像分析技术观察人胃癌及癌前病变中
、阳性细胞数和表达强度,用图像分析系统进行阳性细胞率及其灰
度检测,算出值,了解胃癌组织局部微环境中树突状细胞表型抗原的变化。
结果癌前病变粘膜中表型抗原增多,阳性细胞数分别为
士矿,与正常胃粘膜士士
比较显著增多,胃癌组织和数量明显多于癌前病变
和正常组,胃癌及其癌前病变比值显著低于正常组。
结论树突状细胞表型抗原在人胃癌组织中的表达总量增多,由于
其抗原提呈能力降低,导致胃癌组织中细胞功能低下,胃癌组织中树突状细胞无
法发挥抗胃癌的免疫调节作用。
关键词胃癌树突状细胞表型功能
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第二部分胃癌患者外周血树突状细胞
形态及功能的研究
目的通过对健康人和胃癌患者外周血人树突状细胞的诱导、培养及其表面分
子的研究,从形态学、细胞表面标志及功能上与健康人比较。
方法从健康人和胃癌患者外周血获取单核细胞,经和工持续诱导
天,以获取高纯度,然后观察形态研究健康人及胃癌患者细胞
表型检测、的群体内吞能力测定、健康人及胃癌同种混合淋巴
细胞反应。
结果在细胞的形态上,与健康人相比,电镜下胃癌表面突起较短,
细胞核不规则在细胞表型上,胃癌树突状细胞的表面标志明显低于健康人的
表面标志培养上清液中的水平测定中,胃癌比
健康人患者明显降低。在群体内吞能力检测中,健康人群体内吞能力培养
第天达高峰,其后明显下降,而胃癌第三天后群体内吞能力无明显下降,第五
天达最高峰胃癌患者诱导同种异体淋巴细胞转化的能力低于健康人
结论在细胞因子作用下,能从胃癌患者的外围血单核细胞中培养出较高纯度
的,但是胃癌抗原提呈能力比健康人低,无法发挥特异性抗胃癌免疫作用
了解胃癌外周血树突状细胞的状态,为以后基于树