文档介绍：水飞蓟提取物中水飞蓟宾的含量测定摘要: 目的: 建立水飞蓟提取物中水飞蓟宾的含量测定方法。方法: 本实验采用 Diamonsi ( TM) C18 ( × 250mm ,5 ?滋 m )色谱柱;流动相为甲醇:水:冰醋酸=42 : 58: ;检测波长为 288nm ;每次进样量 20 ?滋 L; 流速: ; 结果: 水飞蓟宾在 ~ ?滋 g 范围内与其峰面积呈良好线性关系。回归方程是 y=41676X+178737 , R2= 。结论:本实验采用 HPLC 测定水飞蓟提取物中主要成分水飞蓟宾的含量, 方法简便、结果准确、重现性好, 可用于水飞蓟提取物中水飞蓟宾的含量测定方法。关键词:水飞蓟;水飞蓟宾; HPLC 水飞蓟中黄酮类物质是自菊科植物水飞蓟种子中提取的药用有效成分, 是一类以二氢黄酮醇与苯丙素类衍生物缩合而成的具有 C-9 取代基的黄酮木质素类化合物[1, 2] 。其中主要成分有水飞蓟宾、异水飞蓟宾、水飞蓟宁、水飞蓟亭四种同分异构体。其中水飞蓟宾含量最高, 保肝活性最强[3, 4], 是水飞蓟中黄酮类物质含量测定的标准物质[5, 6]。本文采用 Diamonsi ( TM) C18 ( × 250mm ,5 ?滋 m )色谱柱,以甲醇:水:冰醋酸=42 : 58: 为流动相;在 288nm 检测波长下,采用 HPLC 测定水飞蓟提取物中主要成分水飞蓟宾的含量,取得了较理想效果。 1 实验仪器与材料 PL203 电子天平( 上海江仪仪器有限公司); KQ-100E 型超声波处理器(济南华舜仪器有限公司); Waters 2695 高效液相色谱仪(美国沃特世 waters 有限公司); 水飞蓟宾对照品( 中国生物药品检验所); 水飞蓟黄酮类物质提取物(东宁县龙翔中药饮片有限公司) ;其他试剂均为色谱纯。 2 方法与结果 色谱条件本实验采用 Diamonsi ( TM) C18 ( × 250mm ,5 ?滋 m) 色谱柱; 流动相为甲醇:水:冰醋酸=42 : 58: ;检测波长为 288nm ;每次进样量 20 ?滋 L; 流速: ; 理论板数按水飞蓟宾峰计算应不低于 4000 。取对照品溶液及供试品溶液在该色谱条件下分别各进样 20?L, 记录色谱。详见图 1 、图 2 。由图可知,水飞蓟宾与其它组分分离良好。 溶液的制备 对照品溶液的制备精密称取水飞蓟宾对照品 50mg ( 精确至 ), 置于 500mL 容量瓶中,加甲醇制成每 1mL 含 500 ?滋 g 的溶液,即得。 供试品溶液的制备精确称取水飞蓟黄酮类物质提取物 50mg (精确至 ) ,置 50m L 容量瓶中,用甲醇溶解,超声处理 30min 。冷却后,加甲醇稀释至刻度, 摇匀并滤过。精确量取 5mL ,置 50mL 容量瓶中,加入流动相稀释至刻度, 摇匀备用。 线性关系考察精确量取水飞蓟宾对照品溶液 , , , , , , , mL ,分别置 50mL 容量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀。各精密量取 2