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观赏用柳树无性系再生体系建立及其遗传转化研究.pdf

上传人:459972402 2014/6/24 文件大小:0 KB

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文档介绍

文档介绍:~/腘能诱导出胚性愈伤组织。耐锋呙顾作为抗菌素抑制和去除农杆菌最佳,且对愈伤金丝垂柳打×.“属杨柳科、柳属;落叶乔木,叶披针形,枝条下垂,黄色,树姿优美,枝条颜色鲜艳≈ιぜ窘呈黄绿色,休眠季节呈金黄色共⌒郧浚壑辏杭静环尚酰换嵩斐苫肪澄染,生长快;喜光,喜温暖湿润气候和湿润、深厚的土壤,但对土壤适应性较强,耐水湿,在河边生长尤好:在土层深厚、地势干燥的地区也能正常生长,萌芽力本文研究金丝垂柳淖榕嘣偕逑担⒗檬衅际醵圆煌ǘ取不同激素的愈伤组织进行了细胞形态学观察的研究,目的是研究影响金丝垂柳偕牟煌蛩兀煌ü┡└司榈挤ǘ越鹚看沽鳭进行遗传转化研究,经过抗生素筛选培养,获得了转基因抗性愈伤组织,并通过橹色对转基因愈伤组织进行了初步检测。鹚看沽鳭组织培养再生体系的建立无菌材料快繁以一甀/.琇和·几/惶媸褂米罴眩灰砸镀⒕/.疞几的培养基上诱导愈伤组织效果根效果较好。愈伤组织诱导结果表明在愈伤组织诱导过程中,在培养基中添加甇~组织和组堵苗生长影响不大。在卡那霉索疞时愈伤组织褐化死亡率液体培养基活化农杆菌;,共培养时间天有利于提高转化率;转化后的外植体经觳猓丈5渡ǎ得魍庠基因初步整合到植株基因组小细胞学研究表明金丝垂柳逑赴卟谟俗橹砻妫鹪从诒”细胞,是否为单细胞起源还是多细胞起源还有待于进一步的研究。关键词:金丝垂柳河俗橹恢仓暝偕桓┡└司灰糯;籊分类号:强。最好,愈伤组织诱导率可达ィ簧嘌/郊覰/咝杂俗橹慕瓸蜃;└司榈迹砸镀魑M庵蔡褰星秩荆肐/和衅鄄煊俗橹诓拷峁山东师范大学硕士学位论文/,
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杪觑学位论文储躲易锄翩等:杪;堑李翩缔签字嗍彩月’本人授权』趁可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可学位论文作者签名:咖签字日期:年拢痷日独创声明学位论文版权使用授权书爹本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得没有其他需要特别声明的,本栏可空蚱渌逃沟难换蛑な槭褂霉牟料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的晚明本学位论文作者完全了解堂撞有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑解密后适用本授权书ⅲ喝并表示谢意。一’
,木本植物离体培养进展很快,已有嘀帜颈局参锘竦猛暾偕植株,柳树离体培养就是其中的一例。柳树的离体培养研究已在茎尖、愈伤组织、叶培养、原生质体分离培养等方面取得了一些进展。但是到目前为止,我国在柳树再生研究方面仅仅停留在快速繁殖组培苗的技术上【。.ァ⒆右丁⒁、实生苗、幼树或老树上取茎尖或愈伤组织进行培养。唐效蓉等将柳树枝条冲洗干净置于超净工作台上,以%.サ穆然芤合—儆梦蘧逑—危缓蠹羧〕..的带芽或不带芽愈伤组织或剥取—长茎尖,接种于将愈伤组织转接在—/或/嘌蟹只鲅浚侔蜒孔5胶琹/..疞中诱导出根,获得了完整的植株【习。黄华艳等将采回的柳树萌发枝条剪去大部分叶片,用洗衣粉漂洗自来水下冲洗,紫外光照射;在无菌条件下,用%;用%升汞浸泡进行二次消毒,无菌水洗危晃蘧輑螅庵蔡逵镁鹁淼滤纸吸干,切成带霾嘌康男∮/.疞交替使用,可促进芽的增殖和芽生长;经过壮芽培养可提高生根率,。昧鞔芽茎段外植体获得无菌苗,然后再将无菌苗上的叶片接种到../..疞培养基上,,形成愈伤组织。养基;生根培养基为/蚀%山东师范大学硕士学位论文
..冲取得原生质体并培养出效蓉等利用上述愈伤组织为外植体获得再生植株的培养基,以叶片为外观赏价值低;雌性垂柳每年春季种子成热吖旆尚酰现匚廴净肪硉。植体也同样获得了大量的丛生芽。有的经过愈伤组织产生芽,将芽转到无植物生物生长调节物质的培养基中生根,形成的小植株经驯化后,在温室中生长良好原生质体是去掉细胞壁的裸露植物细胞。从世纪年代初首次由烟草原生质体培养出再生植株以来,至今已有嘀指叩