文档介绍：植物总DNA的提取及琼脂糖凝胶电泳检测
制作人：刘红梅
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植物基因组 DNA的提取
琼脂糖凝胶电泳检测
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脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)
与蛋白质结合在一起以核蛋白（DNP）的形式存在。在制备核酸时通常破坏细胞壁及细胞膜来使核蛋白释放出来。
植物总DNA包括细胞核DNA和细胞核外DNA,前者存在于细胞核内，后者存在于细胞质中有半自主性复制活性的细胞器内，例如线粒体DNA(mtDNA)和叶绿体DNA(ctDNA)。
背景知识
核酸的存在形式
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DNA为白色类似石棉样的纤维状物， RNA的纯品呈白色粉末或结晶。核酸和核苷酸大都呈酸味。
DNA、RNA和核苷酸都是极性化合物，一般都溶于水，不溶于乙醇、***仿等有机溶剂，它们的钠盐比游离酸易溶于水。
在酸性溶液中，核酸易水解，中性或弱碱性溶液中较稳定。
核酸的理化性质
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细胞破碎抽提去蛋白质沉淀核酸
基本过程
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①机械方法：超声波处理法、研磨法、匀浆法；
②化学试剂法：用SDS处理细胞；
③酶解法：加入溶菌酶或蜗牛酶，破坏细胞壁。
细胞破碎
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SDS法 SDS是有效的阴离子去垢剂, 细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合, SDS能够破坏这种价键。
CTAB法 CTAB是一种阳离子去垢剂，它可以溶解膜与脂膜，使细胞中的DNA-蛋白质复合物释放出来，并使蛋白质变性，使DNA与蛋白质分离。
DNA提取
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蛋白质常用苯酚：***仿：异戊醇（25：24：1）或***仿：异戊醇（24：1）抽提。
RNA 常选用RNase消化，或是用LiCl来消除大分子的RNA。
酚类物质提取液中加少量巯基乙醇，选取幼嫩的材料。
多糖提取液中加1％PVP。
DNA纯化（去杂质）
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实验材料
新鲜蔬菜叶片(去叶脉)
试剂
2×CTAB抽提液
TE 缓冲液(pH=)
***仿：异戊醇(24:1)
材料与试剂
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①离心机
②水浴锅
③研钵
④微量移液器
仪器用具
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