文档介绍：鸦胆子提取物鸦胆子苦素 E（Bruceine E）的抗 HIV-1 活性及机
制研究
背景 :HIV/AIDS 是严重威胁人类健康全球流行性疾病 , 目前仍无有效的预防
性疫苗及根治性药物问世。治疗的主要困难在于 ,HIV-1 所具有的高复制特性及
高突变特性 , 使 HIV-1 很快产生耐药突变 , 并突破耐药基因屏障 , 形成耐药准种而
致治疗失败。
在发明有效的疫苗之前 , 寻找到更有效的药物与治疗靶点 , 是抗 HIV-1 感染
的主要目标之一。天然产物小分子为新药的开发提供了丰富多样的来源及结构前
体。
传统中草药是中华民族几千年来的经验与智慧总结 , 是现代药物研究的重要
来源与宝贵资源。用现代手段提取的中草药化合物小分子 , 在抗感染、肿瘤治疗
等方面取得了丰硕的成果。
本研究拟从鸦胆子果实中提取分离苦木内酯类化合物 , 并结合前期进行的抗
HIV-1 初筛结果 , 对发现的具有抑制 HIV-1 活性的鸦胆子苦素 E, 进一步展开细胞
毒性、抗 HIV 的活性及其机制的研究。第一部分鸦胆子苦素 E 的分离、提纯及细
胞毒性检测目的 : 从植物鸦胆子的干燥果实中分离提取鸦胆子苦素 E, 并对其进
行细胞毒性检测。
方法 : 首先将干燥鸦胆子果实经乙醇浸泡 , 浸出液制成无乙醇浸膏 , 再经过萃
, 分别得到石油醚部分、乙酸乙酯部分、正丁醇部分。对乙酸乙酯部分再经过
硅胶柱层析色谱、制备型薄层色谱、 MCI柱层析、 Sephadex LH-20 凝胶柱色谱、半制备型 HPLC等进行化学成分的分离。
最后 , 利用 ESI-MS,UV,IR,1 H-NMR,13C-NMR,DEPT,HSQC,HMBC,NOESY等波普
对单体化合物进行结构鉴定。应用 MT2细胞和 TZM-bl 细胞 , 通过形态学、 MTT法
分别检测该化合物细胞毒性 , 计算该化合物的半数细胞毒性浓度 (CC50), 获得药
物的安全范围。
结果 : 共分离并鉴定得到 11 个单体化合物 , 均为苦木内酯类 : 鸦胆苦醇、鸦胆
亭醇、鸦胆子苦素 M、鸦胆子苦素 D、鸦胆子苦素 J、鸦胆亭、鸦胆子苦烯、鸦
胆苦内酯 S、鸦胆子苦素 E、鸦胆甙 A、鸦胆苦甙 A。对其中的化合物鸦胆子苦素
E(Brucine E) 用 MT2细胞进行进行的检测结果显示该化合物细胞毒性较低 , 化合
物作用 72h, 对 MT2细胞的 CC50为 1312μM(95%CI:1157-1487μM), 对 TZM-bl 细
胞的 CC50为 μM(95%CI:-1101 μ M)。
结论 : 乙酰乙酯萃取部分分离鉴定出 11 个苦木内酯类化合物 , 其中 Brucine
E 细胞毒性较低 , 具有较高的浓度安全范围。第二部分鸦胆子苦素 E 的抗 HIV-1
活性目的 : 评价鸦胆子苦素 E(Brucine E