实训七 细菌的生化试验.doc

文档介绍：实训七细菌的生化试验
目的要求了解细菌生化试验的原理、方法及在细菌鉴定中的意义。
仪器及材料温箱、接种环、酒精灯、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基、葡萄糖蛋白胨水培养基、醋酸铅蛋白胨水培养基、柠檬酸盐琼脂斜面培养基、MR试剂、VP试剂、靛基质试剂、大肠杆菌、产气杆菌、沙门氏菌的24h纯培养物等。
方法与步骤
细菌都有各自的酶系统,因此,都有各自的分解与合成代谢产物,而这些产物就是鉴别细菌的依据。所谓细菌的生化试验,就是用生物化学的方法检查细菌的代谢产物。生化试验的种类很多,下面介绍几种常用的生化试验,部分生化试验结果见彩图13、14、15。
(一)糖发酵试验有些细菌能分解糖产酸,从而使指示剂变色。试验时,将细菌无菌操作接种于糖发酵培养基中,于37℃培养24~48h,结果有三种:有的只产酸(+),有的产酸产气(⊕),有的不发酵(-)。
(二)甲基红(MR)试验与维-培(VP)%葡萄糖蛋白胨水培养基中,置37℃温箱培养4d,分别作甲基红和维-培试验。
,加入甲基红试剂(%酒精300ml中)5~6滴,液体呈红色者为阳性,黄色者为阴性,橙色者为可疑。
-培试验取上述培养基一支,先加维-培甲液(6%α-甲萘酚酒精溶液)3ml,再加入维-培乙液(40%氢氧化钾水溶液)1ml,混和后静置于试管架内观察2~4h,凡液体呈红色者为阳性,不变色者为阴性。
(三)靛基质试验有些细菌能分解蛋白胨中的色氨酸产生靛基质(吲哚),遇相应试剂而呈红色。试验时,取菌接种于蛋白胨水培养基中,37℃培养2~3d;于培养