文档介绍：(一)化学因素对微生物生长的影响
(二)细菌的生理生化反应
实验五
实验目的:
了解常用化学消毒剂对微生物的作用
实验原理:
1 氧化剂:通过强烈的氧化作用杀死微生物。
碘的杀菌力强,3-7%碘溶于70-83%的乙醇中成碘酒。
2 重金属盐类:使蛋白质变性、沉淀,使酶失活。 0·02-0·2%Hgcl2(升汞)溶液对大多数细菌有致死作用。
实验一化学因素对微生物生长的影响
3 有机溶剂:使蛋白质及核酸变性、破坏细胞膜透性,抑制脱氢酶,氧化酶活性。
乙醇(70%)
4 表面活性剂:具有降低表面张力效应的物质,可抑菌或杀菌。
甲酚杀菌力最强
煤酚皂液(来苏尔)为甲酚和肥皂的混合液。
新吉尔灭:破坏细胞的渗透性
实验材料
1 菌种:
大肠杆菌
2 培养基:
牛肉膏蛋白胨培养基
3 消毒剂:
%碘酒,%升汞,75%乙醇, 100%乙醇,1%来苏尔, %新洁尔灭,无菌生理盐水
实验步骤
实验结果
1 倒牛肉膏蛋白胨平板
2 ,涂布均匀。
3 将平板(皿底)划分为6等份,分别将浸有各种消毒剂的小圆滤纸片贴在平板的每一等份中。
4 将贴好滤纸片的含菌平板,置37℃倒置培养24h。
5 测量并记录抑菌圈的直径,根据其直径的大小,可初步确定测试药品的抑菌效能。(自带尺子)
P102 :1(1);2
实验二:细菌的生理生化反应
(IMViC 与硫化氢试验)
吲哚(I)、甲基红(M)、(Vi)柠檬酸盐利用(C)试验。用以将大肠杆菌与其形状十分相近的肠杆菌属的细菌鉴别开来。
实验目的:
1 学习几种主要微生物的生理代谢试验及检验方法
认识微生物代谢类型的多样性。
2 了解IMViC反应在肠道菌鉴定中的意义和方法
实验原理:
1 吲哚试验: 用来检测吲哚的产生,有些细菌能产生色氨酸酶,分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚和丙氨酸。
吲哚+ 对二甲基氨基苯甲醛红色的玫瑰吲哚
2 甲基红试验() :大肠杆菌与产气杆菌在利用葡萄糖进行发酵时,前者可产生大量的混合酸,使pH﹤;后者则产生大量的中性化合物丁二醇,pH﹥,因此在发酵液中加入甲基红试剂时,前者呈红色,后者呈黄色。
葡萄糖
乳酸丙酮酸
乙醛乙酰CoA 甲酸
乙醇乙酰乳酸
二乙酰 3-羟基丁酮
2,3-丁二醇
CO2 H2
-乙酰乳酸合成酶
-乙酰乳酸脱羧酶
2,3-丁二醇脱氢酶
一些细菌具有-乙酰乳酸合成酶系而进行丁二醇发酵。
EMP
产气杆菌
大肠杆菌
大肠杆菌
3
碱性条件
氧
红色化合物
(与培养基中精氨酸的胍基结合)
发酵途径: