文档介绍：第25章病毒及其疫苗的生产制
备技术
第一节病毒的生产制备
细胞培养技术,在病毒学研究方面
获得了广泛的应用,为病毒的繁殖
、鉴定提供了来自不同动物(包括
人)、不同组织的细胞来源,通过
敏感性筛选,绝大多数病毒均可有
相应的敏感细胞,为病毒的分离、
鉴定和增殖创造了条件,也为病毒的
大量生产提供了细胞来源,只要有
敏感的细胞,就可以进行大规模生
产。
一、病毒生产的目的和用途
1、为了制备大量的病毒抗原,以制备病毒的亚单
位疫苗或表面抗原疫苗,或用病毒抗原制备免
疫血清(抗体)。
2、为了制备病毒的减毒活疫苗或灭活的死疫苗,
以用于预防接种。
3、为了生产基因改造后或重组有其它多肽因子的
病毒,以用于基因治疗或杀肿瘤治疗及基因疫
苗的预防接种。
4、为了制备干扰素的病毒诱生剂(NDV、仙台
病毒等),用于干扰素的生产。
5、生物战用的病毒生物战剂。常选用毒力强、抵
抗力强、对不同国家人群最敏感的病毒,又能
通过气溶胶或昆虫和污染的水土进行传播的病
毒。这是战争狂们正在开展的研究,应警惕。
二、病毒生产制备的方法
1、动物接种,如狂犬病毒、脑炎虫媒病毒采用
鼠、兔脑内接种后收取脑组织制成悬液。
2、鸡胚、鸭胚接种:如流感病毒、副流感病毒
(NDV-F)、仙台病毒等,目前尚无敏感细
胞,常采用9~10日胚龄的尿囊腔接种,37℃
孵育72小时收获尿液,用鸡红血球测定血凝
效价。Q热用7日龄鸭胚进行卵黄囊接种收获
卵黄囊,马脑炎病毒常采用10日龄鸡胚体接
种,收获全胚体液等。
3、细胞培养法(详见第二篇第18章)
第二节病毒疫苗的生产制备
•病毒疫苗的生产制备与病毒的生
产制备基本相同,目前进行人工
主动免疫,用于病毒病预防的疫
苗有灭活疫苗(Killed ine),
又称死疫苗,减毒活疫苗(Live
ine),亚单位疫苗,多肽疫苗
、基因缺失的减毒活疫苗,基因
工程亚单位疫苗,重组牛痘多价
疫苗。
一、病毒疫苗的种类
(一)灭活疫苗
(二)减毒活疫苗
(三)亚单位疫苗
(四)多肽疫苗
(五)基因缺失的减毒活疫苗
(六)基因工程亚单位疫苗
(二)细胞培养法制备的常用疫
苗(表25-1)
疫苗制备疫苗
培养方法
名称活/死(疫苗株) 的细胞
脊髓灰灭活(Salk株猴肾细胞(原代转瓶培养
) /2-3代)
质炎疫苗活(Sabin株) Vero细胞微载体培养
腮腺炎活(ME株) 幼地鼠、狗肾转瓶培养
疫苗豚鼠肾细胞罗氏瓶培养
Edomonste、原代鸡胚纤维母罗氏瓶培养
L16、沪191 细胞,人二倍体转瓶培养
麻疹活疫
、人羊膜、狗肾、
苗
Moraten、羊肾
Schwar2株豚鼠肾细胞
单纯疮疹兔肾、豚鼠肾罗氏瓶培
养
死(72株)
病毒疫苗豚鼠胚成纤维细转瓶培养
胞
巨细胞病 WI-38人胚肺细转瓶培养
活(Towne株)
毒疫苗胞
狂犬病毒死(AV01/AV02 人二倍体细胞微载体培
疫苗株) 养
(CUS株)
流行性乙
多层滋养
型灭活(5-3株) 人二倍体细胞
增殖器
脑炎疫苗
森林脑炎鸡胚纤维母细胞
病毒疫苗灭活幼地鼠肾细胞转瓶培养
•三、用细胞培养制备病毒疫苗的优点:
•(1)在细胞传代期间可进行比较全面的检查
,特别是对潜在病毒和致癌性的检查,确保
安全。
•(2)可使逐渐适应于无血清(或无蛋白)培
基中生产繁殖,以排除过敏因素。
•(3)可挑选对病毒敏感的细胞克隆。以利病
毒在细胞中大量增殖,有助于疫苗产量的提
高。
•(4)易于大量生产和进行连续自动化工业生
产,以满足量的需求。