文档介绍：第三章基因工程载体
vectors
在基因工程操作中,把能携带外源DNA进入受体细胞的DNA分子叫载体。
1. 载体(Vectors)
(1)在宿主细胞内能独立复制。
(2)有选择性标记。
(3)有一段多克隆位点。
2. 基因工程对载体的要求
外源DNA插入其中不影响载体的复制。
(4)分子量小,拷贝数多。
(5)容易从宿主细胞中分离纯化。
3. 载体的种类
基因工程中常用的载体有5类:
质粒(plasmid)
单链DNA噬菌体M13
噬菌体的衍生物
柯斯质粒(cosmid)
动物病毒(virus)
第一节质粒载体
一、质粒(plasmid)
是独立于染色体以外的能自主复制的双链闭合环状DNA分子。
存在于细菌、霉菌、蓝藻、酵母等细胞中。
大肠杆菌的质粒
(1)分子小:
1. 质粒的一般生物学特性
1—200 kb
(2)编码基因少:
2—3个中等大小的蛋白质。
(3)环形状:
双链环状DNA。
(酵母的“杀伤质粒”是RNA)。
如抗菌素抗性、代谢特征等,赋予细菌一些额外的特性(非必须)。
(4)质粒的空间构型:
① cDNA)
呈超螺旋(SC)(super coil)
Covalent close circular DNA
③线形DNA ( linear ,lDNA)
一条链上有一至数个缺口。
②开环DNA( open circular, ocDNA)