文档介绍：高效液相色谱使用常见问题
症状：
(一）保留时间变化
可能的原因 : 解　决方　法
1．柱温变化 : 柱恒温
２。等度与梯度间未能充分平衡 : 至少用１0倍柱体积的流动相平衡柱 :　用>25mｍol/L的缓冲液 ﻭ４。柱污染　：每天冲洗柱　
：稳定进样条件,调节流动相：采用保护柱
(二）保留时间缩短
可能的原因 : 解决　方法
1。流速增加　:　检查泵，重新设定流速 ﻭ2。样品超载 : 降低样品量　：流动相PH值保持在3～
4。流动相组成变化：防止流动相蒸发或沉淀
：　柱恒温
(三)保留时间延长
可能的原因 : 解　决方法
　:　管路泄漏，更换泵密封圈，排除泵内气泡　 : 用流动相改性剂，如加三乙***,或采用碱至钝化柱：同前（二）3
４．流动相组成变化：同前（二)4
5。温度降低 : 同前（二）5
(四）出现肩峰或分叉
可能的原因 ：解决方法
：用流动相配样，总的样品体积小于第一峰的1５％　　:　采用较弱的样品溶剂
3。柱塌陷或形成短路通道：更换色谱柱，采用较弱腐蚀性条件
4。柱内烧结不锈钢失效：更换烧结不锈钢，加在线过滤器，过滤样品 ﻭ５．进样器损坏　: 更换进样器转子
(五）鬼峰
可能的原因 ：　解　决方　法
1。进样阀残余峰 :　每次用后用强溶剂清洗阀，改进阀和样品的清洗　
２．样品中未知物 : 处理样品
: 重新平衡柱，用流动相作样品溶剂（尤其是离子对色谱) ﻭ４。三***乙酸(TFA)氧化（肽谱)　: 每天新配，用抗氧化剂　(反相)　: 通过变化平衡时间检查水质量,用HPLC级的水
(六)基线噪声
可能的原因 ：解决　方法
1。气泡（尖锐峰）：流动相脱气,加柱后背压 ﻭ２。污染（随机噪声）：清洗柱，净化样品，用HPLＣ级试剂
3。检测器灯连续噪声 : 更换氘灯
（偶然噪声) ：采用稳压电源，检查干扰的来源（如水浴等) : 流动相脱气,加柱后背压
（七）峰拖尾
可能的原因 : 解决方法
１。柱超载：降低样品量，增加柱直径采用较高容量的固定相：清洁样品,调整流动相　　加三乙***，用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相PＨ值，钝化样品 ﻭ4。同前（四）４：同前（四)4 (四)3 5． : 同前(四)３ ﻭ6．死体积或柱外体积过大　：连接点降至最低，对所有连接点作合适调整，尽可能采用细内径的连接管　：用较低腐蚀条件,更换柱，采用保护柱
（八)峰展宽
可能的原因 ：解决方法
：同(四)1 ﻭ２。在进样阀中造成峰扩展：进样前后排出气泡以降低扩散
3．数据系统采样速率太慢　：设定速率应是每峰大于10点 ﻭ4。检测器时间常数过大 :　设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的1０％
：增加柱温,采用低粘度流动相 ﻭ６.