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DB13T 1767-2013 苹果品种DNA指纹鉴定.pdf

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DB13T 1767-2013 苹果品种DNA指纹鉴定.pdf

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DB13T 1767-2013 苹果品种DNA指纹鉴定.pdf

文档介绍

文档介绍:ICS
B 05
DB13
河 北 省 地 方 标 准
DB 13/T 1767—2013

苹果品种 DNA 指纹鉴定


2013 - 09 - 05 发布 2013 - 09 - 30 实施
河北省质量技术监督局 发 布
DB13/T 1767—2013
前 言
本标准按照GB/T —2009给出的规则起草。
本标准由河北省林业厅提出。
本标准起草单位:河北农业大学。
本标准主要起草人:刘兴菊、杨敏生、梁海永、张军、左立辉、李雪雁、姚伟明、杨立华、韩志校
魏姗姗、甄红伟、王瑞霞。
I
学兔兔
学兔兔
DB13/T 1767—2013
苹果品种 DNA 指纹鉴定
1 范围
本标准规定了苹果品种DNA指纹鉴定的方法及判定标准。
本标准适用于苹果品种鉴定及河北省苹果品种DNA指纹库的建立。
2 原理
不同苹果品种由于遗传组成不同,基因组DNA中简单重复序列的重复次数有差异,这种差异可经过
PCR扩增、电泳分离、显色程序绘制的DNA指纹图谱加以区分,从而对不同品种进行鉴定。从苹果幼苗、
叶片等组织中提取总DNA,利用SSR引物对位于不同染色体上的SSR位点进行PCR扩增,不同碱基长度的PCR
扩增产物通过聚丙烯酰***凝胶电泳分离(或通过DNA分析仪、测序仪进行分离),并通过染色显示DNA
指纹谱带类型。
3 仪器设备及试剂
苹果品种DNA指纹鉴定所需仪器设备及试剂名单见附录A。
4 溶液配制
苹果品种DNA指纹鉴定相关溶液配制方法见附录B。
5 鉴定方法
样品准备
取样量
每份送检样品至少检测3个个体,每个个体至少1g,对一致性差的样品应至少检测5个个体。
品种比较方式
a) 成对品种的比较
送检样品提供两份,一份为待检品种,一份为对照品种。将待检品种与对照品种直接进行成对比
较。杂交后代需提供母本与父本的样品。
b) 品种与 DNA 指纹库入库品种的比较
送检样品可提供一份。将待检样品与 DNA 指纹库所有入库品种的指纹进行比较,筛选出指纹最相