文档介绍：细胞培养基本技术
细胞培养的基本概念
原代培养:
取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞在传代之前称为原代培养。
传代培养:
细胞在培养器皿中生长一定时间后,被分开接种到新的培养器皿中。
细胞培养:使用单个细胞悬液
组织培养:使用组织块(~1立方毫米)或薄片( 毫米)在固定或悬浮状态下培养
器官培养:使用器官原基或器官的一部分或整个器宫
原代培养细胞的生命归宿
原代培养期
传代期
衰退期
有限细胞系
无限细胞系
细胞系(cell line)
细胞株(cell strain)
培养细胞的特性
培养细胞的生长方式
贴附生长:
必须贴附于支持物表面才能生长。见于各种实体瘤细胞。
悬浮生长:
于悬浮状态下即可生长,不需要贴附于支持物表面。见于各种造血系统肿瘤细胞。
每代贴附生长细胞的生长过程
游离期
贴壁期
潜伏期
对数生长期
停止期(平台期)
游离期:
。此时细胞质回缩,胞体呈圆球形。
10分钟一4小时
贴壁期:
细胞附着于底物上,游离期结束。细胞株平均在10分钟一4小时贴壁。
底物:胶原、玻璃、塑料、其它细胞等
血清中有促使细胞贴壁的冷析球蛋白和纤粘素、胶原等糖蛋白(生长基质),这些带正电荷的糖蛋白的促贴壁因子先吸附于底物上,悬浮细胞再与吸附有促贴壁因子的附着。
进口塑料培养瓶涂有生长基质(化学合成的功能基团)