文档介绍：Proteomics
复旦大学生命科学学院
吴超群
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Part VIII.
Mass
Spectrometry
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蛋白质组研究的核心是系统识别一个细
胞或组织中表达的每一个蛋白质, 以及确定
每个蛋白质的突出特征。
其分析技术包括
¾ 分离蛋白质和肽的分离技术
¾ 识别和定量分析物的分析技术
¾ 数据管理及分析的生物信息学技术
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质谱已成为肽和蛋白分析的重要工具,主要
归功于一些软电离技术的应用,如电喷雾( ESI)
和基体辅助激光解吸电离(MALDI)。
生物大分子多为极性、难挥发化合物,不易
气化,用传统质谱无法测定。但随着新的离子化
技术的广泛应用,现已能高效地电离一些完整或
片断的大分子生物聚合物,从而进行质谱测定。
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Mass spectrometry (MS)
质谱( Mass spectrometry )是带电原
子、分子和分子碎片按质荷比(或质量)的
大小顺序排列的图谱。
质谱仪是一类能使物质粒子高化成离子
并通过适当的电场、磁场将它们按空间位置、
时间先后或者轨道稳定的程度实现质荷比分
离, 并检测它们的强度的一类仪器。主要由
电学系统、分析系统和真空系统组成。
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1. Basic Principles (基本原理):
质谱仪是利用电磁学原理,使带电的样品离子
按质荷比进行分离的装置。离子电离后经加速进入磁
场中,其动能与加速电压及电荷 z 有关,即:
z e U = 1/2 m ν2
(其中z为电荷数,e为元电荷(e=×10-19C),U
为加速电压,m为离子的质量, ν为离子被加速后的
运动速度。)
具有速度ν的带电粒子进入质谱分析器的电磁
场中,根据所选择的分离方式,最终实现各种离子
按 m/z 进行分离。
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MassMass SpectrometrySpectrometry
MassMass SpectrometrySpectrometry isis aa tooltool toto analyzeanalyze thethe
.
InIn generalgeneral aa MassMass SpectrometerSpectrometer consistsconsists of:of:
– Ion Source
– Mass Analyzer
– Detector
MassMass SpectrometersSpectrometers areare usedused toto quantifyquantify thethe
massmass--toto--chargecharge (m/z)(m/z) ratiosratios ofof .
FromFrom thisthis quantification,quantification, aa massmass isis determined,determined,
proteinsproteins areare identified,identified, andand furtherfurther analysisanalysis isis
.
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Introduce sample to the instrument
Generate ions in the gas phase
Separate ions on the basis of differences in m/z
with a mass analyzer
Detect ions
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用于分析的样品分子(或原子)在离子源中离化成具有
不同质量的单电行分子离子和碎片离子,这些单