文档介绍：湖南农业大学
硕士学位论文
草莓再生体系的优化及转JERF<,33>基因提高其抗病性的研究
姓名:康厚祥
申请学位级别:硕士
专业:果树学
指导教师:杨国顺
20070501
摘要草莓是一种重要的多年生常绿草本植物,其果实味道鲜美,营养丰富,经济价值高,既可用于鲜食,又可用于加工,深受人们的喜爱。但由于各种病害通过转基因的手段来增强植物的抗病性是一种行之有效的方法,转入特定的病程相关基因能增强植物对某种或某几种特定病害的抵抗能办,但要获得多抗、高抗的品种,就必须同时转入多个基因,就目前技术而言是难以做到的。导入调节抗逆基因表达的转录因子基因可能对全面增强作物抗逆性本研究主要以丰香、章姬为试材,对再生体系进行了优化,在此基础上,利用农杆菌介导法将转录因子基因刀基因导入草莓中。对抗性植株进行点杂交检测,获得了转基因草莓植株。对转基因植株接种炭疽病试本试验获得的主要结果如下:丰香最适培养基配方为,.//淦骄偕渴/葺镀庵蔡褰幸桓鲂瞧诘陌蹬嘌欣谄洳欢ㄑ吭偕实奶岣摺哉录Р葺镀凶;颍齂秆≡偕龅闹仓杲蠵检测,其阳性率为%:对觳獾难粜灾杲蠨斑点杂交,。峁砻髯;蛑的危害,草莓的产量和品质受到严重的影响。因此提高其抗病性对草莓生产具有重要的实际意义。草莓转基因已有成功的报导。提供了一种全新的途径。验发现,其抗炭疽病能力显著增强。⒘朔嵯恪⒄录У囊镀咝г偕逑担湓偕示锏%,其中为个,章姬最适培养基配方为,.均再生芽数目达到个。与对照株相比其抗性显著增强。关键词:草莓再生体系遗传转化抗病性/.
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缩略词表英文缩写Ⅵ碱性亮氨酸拉链花椰菜花叶病毒羧苄青霉素低温调控制干旱应答元件结合蛋白乙烯乙烯应答元件乙烯应答元件结合蛋白吲哚乙酸光密度干旱应答Ⅲ硒英文名称中文名称一谢汆堰脱落酸氨苄青霉素乙酰丁香酮早应答元件乙烯应答元件结合因子黄咸烟侨┧崽擒彰茉莉酸茉莉酸激发因子应答元件茉莉素乙烯应答元件结合因子卡拉霉素聚合酶链式反应病程相关利福平每分钟转速系统性获得抗性水杨酸应答元件苯基·,噻二唑揠一
日搁:%耳独创性声明关于论文使用授权的说明年∥月八日。。、年翵百叫C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得湖南农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任本人完全了解湖南农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。时间:印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意湖南农业大学可以用不同方式一、’时间;’
第一章前言葺趴葺胩逶偕胍糯;芯拷草莓是一种多年生常绿草本植物,园艺学上将其归为浆果类。草莓果实以其色泽鲜丽,芳香浓郁,果肉柔嫩多汁,酸甜适度,味道鲜美,营养丰富而深受世界各国人民的喜爱。世纪后期,在世界各国草莓消费需求量持续增长的推动下,草莓栽培规模以及产量得到迅速扩增,∈歉鞯爻<恼婢害,特别是灰霉病,已给不少地区造成严重的损失。自年上海首次发现炭疽病以来,多年连作的草莓苗圃炭疽病危害有持续上升的趋势,尤其是匍匐茎能克服这些缺点,因此基因工程技术为增强草莓的抗病性提供了一种可行的方草莓高效再生体系的建立是对其进行转基因的前提之一,草莓再生体系的研究也是目前国内研究得较多的项目。其中再生培养基中以为基本培养基,不同的基因型,不同的外植体,不同的值,生长调节剂的种类、配比张志宏【报导,基因型是影响草莓再生的一个重要因素。王海波等即通过对四种草莓品种进行不定芽再生试验,得出不同草莓品种之间再生能力差异显万懿騮’到年分别增加到万万暧分别增加到万大量抽生的月,发生更为严重,某些感病品种几近毁灭。大田栽培中,草莓苗一旦感染炭疽病,很难用药剂防治,最终导致小苗大量烂心死亡。传统的提高草莓抗病性的育种方法存在时间长与工作量大的缺点,基因工程技术育种法。草莓无菌苗高效再生体系建立进展与浓度,以及圆葺镀欢ㄑ康脑偕哂邢灾挠跋臁.’·.蛐投圆葺偕芰Φ挠跋。
草莓叶片、叶柄等都可作为草莓再生的外植体,曾球薄⑽庋┟贰等通过再生能力比较发现同一基因型草莓中,再生能力是叶片镀读湮斓牟葺读湮S盏挤只欢ㄑ康淖钍室读洌而王海波报导,叶片以斓奈J室耍欢ㄑ糠只首罡摺普通培养基为。通过尹