文档介绍：西南大学
硕士学位论文
芽孢杆菌抗菌蛋白lytic enzyme L27和beta-1,3-1,4-
glucanase抗菌协同作用研究
姓名:刘玉岭
申请学位级别:硕士
专业:分子生物学与生物化学
指导教师:谢建平
20070501
芽孢杆菌抗菌蛋白抗茵协同作用研究摘要’,,分子生物学与生物化学专业硕士研究生谢建平研究员刘玉岭指导老师到电泳纯的两个条带。通过鼶甌托蛄斜榷约ㄕ饬礁龅鞍字史直鹞狶菌蛋白的作用机理不同于传统抗生素,不会导致耐药菌株的产生,因此极有希望开发成为一型广谱而高效的芽孢杆菌抗菌蛋白已经成为国内外研究的主要热点问题之一。藤黄微球菌西南大学硕士学位论文摘要随着抗生素的广泛使用,病原菌耐药性成为了影响公共健康的重要问题。细菌的耐药性主要是滥用抗生素所致,传统的抗生素通过阻断大分子生物合成来发挥作用,而抗菌肽和抗类新型多肽抗生素。对微生物细胞壁有水解功能的酶能够溶解微生物细胞壁而使其死亡,而复合酶克服了一种抗生素只能预防一种病原菌或一种血清型病原菌的不足,具有更广谱更高效的抗菌活性,同时也不存在药物残留和耐药性的问题。从微生物中提取抗菌蛋白成本低、周期短、操作方便,容易实现工业化生产,因此可以发挥更大的工业应用价值。目前,筛选新本论文研究目的:筛选蛋白酶高产菌株,开发更有效的蛋白酶,研究复合酶的抗菌活性和抗菌机理,筛选更广谱更有效的抗菌蛋白。方法和结果:通过脱脂牛奶平板筛选蛋白酶高产菌株,使用分子生物学方法鉴定此菌株属于.。,收集蛋白酶活性峰,甈蚥,,甮。抗菌活性检测显示,两种蛋白的混和物具有广谱的抗菌活性,对金黄色葡萄球菌锢际涎粜跃,大肠杆菌革兰氏阴性菌诰屏阎辰湍婢均有显著的抗菌作用。根据伊,.,.甧和虮J匦蛄猩杓铺匾煨砸铮訠基因组为模板┰觯直鸹竦和腄片段。⒋蟪Ω司⑼碳俚グ⒖莶菅挎吒司⒔鸹粕咸亚蚓<觳饩觳饬街种刈榈鞍准捌浠旌衔锏囊志钚浴=峁示两个重组蛋白的混合物比同种浓度下的单一组分有更广谱更高效的抗菌活性。,、.
关键词:..抗菌蛋白协同作用菌协同作用提供了直接的证据,可以此为基础设计和筛选更广谱更高效的抗菌蛋白和结构短掷氪炕煸幢泶西南大学硕士学位论文摘要在本研究中我们通过分离纯化天然蛋白得到高活性的抗菌组分,构建异源表达工程菌,研究抗菌活性和抗菌协同作用。我们的研究为蚥—的抗肽,研究抗菌机制,开发高活性多功能的抗菌制剂。
,築篗&:篖.—.瓸,淞,琤,籫,.瓵,,甋,甌,.甌甤甌他—,,,,’..:.:,¨
学位论文作者签名:受\玉哙学位论文作者:、≥.襁签字日期:昴暝翵独创性声明学位论文版权使用授权书签字日期:。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果,文中已加许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院可以将学位C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ椋韭畚模喝詹槐C埽导师签名:签字日期:学位论文题目:了特别标注。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋友、同仁在文中作了明确说鞑⒈硎局孕母行弧本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。口保密期限至年月止日,。
第一章文献综述微生物抗菌蛋白研究现状蛋白酶研究进展主要是由于滥用抗生素所致,传统的抗生素通过阻断大分子生物合成来发挥作用。而抗菌肽和抗菌蛋白的作用机理不同于传统抗生素,不会导致耐药菌株的产生,因此极有希望开发成抗菌肽在许多植物、动物、微生物中存在,至今为从核酸序列中已经鉴定或预测了超不易产生抗性菌和交义拮抗性,因此可以发挥更大的阂凳眉壑祊”。抗菌物质主要有两犬类,即低分子鼙抗菌素和高分子量抗菌蛋白质。两南大学硕十学伊论文随着抗生素的广泛使用,病原菌耐药性成为了影响公共健康的重要问题。细菌的抗药性为一类新硝多肽抗生素。过植煌目咕摹綢】.从微生物中提取抗菌蛋白成本低、周期短、操作方便,容易实现工业化生产,而且微生物分泌的细菌素抗菌谱较宽,热稳定性较好,适用范围,“,使用过程目前乳酸菌细菌素冈为具有安全、高效、无毒的优点而被多个国家广泛应。但是由于乳酸菌细菌素只能抑制一些革兰氏阳性菌,而对绝大多数阴性菌和真菌没有抑制作用,且只能在低酸性环境下有高抗菌活性,因此限制了它的使范围。而芽孢杆菌的抗菌物质具有更广谱的抗菌谱、对酸碱度要求不高、热稳定性好、有机溶剂对其活性影响不大、易肿蛹,这些都为芽孢杆菌抗菌蛋白的研究、