文档介绍：南京医科大学
博士学位论文
胶质瘤中脑肿瘤干细胞蛋白质组学和基因组学研究
姓名:王存祖
申请学位级别:博士
专业:外科学(神经外科)
指导教师:傅震;尤永平
20070501
基质辅助激光解析电离英文缩写英文缩略词表英文全名,Ⅲ琺—甦甈.,南京医科大学搏士学位论文
作者签名:啦导师签名:蝉日期:专业:拙作者签名:—社日期:论文独创性声明本论文舷厦疸生膻胜擅王绝胞蛋自廑玺堂塑基匿塑堂盈究是论文使用授权声明我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所徽的贡献均在论文中作了明确的声明并表示了谢意。本人完全了解南京医科大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。南京医科大学博士学位论文
目的:近来,许多研究者先后在脑胶质瘤中发现一种与神经干细胞嗨频南赴岢隽四灾琢龈上赴拍睿衔它们是肿瘤发生和发展的细胞来源。的发现,将对胶质瘤病因和治疗等方面的探索带来深远影响。有关,以下内容是目前共同关注的问题,将是进一步研究的重点。①目前研究的方法,主要是参照了薹ㄓ隢区分,因此,寻找特异性表面标记是进一步研究的基础。②关于胶质瘤发生和发展,假说认为是细胞来源,由于它们自我更新和分化的异常,,调节向普通肿瘤细胞分化的机理是研究重点和质谱技术,以及基因组学,主要是芯片技术,对和已分化肿瘤细胞进行对比研究,寻找特异性标记,探讨分化的相关机理,为胶质瘤起源,诊断和治疗等提供新的思路。本研究分为四个部分,④通过分离,培养和鉴定,验证胶质瘤中是的可能性,为下一步研究奠定基础。②蛋白质组学研究,建立和唤褐柿鱿赴钜煨缘鞍孜目猓瓳基因组学研究,建立上述二种细胞差异性基因文库。④将上述二个文库结合,进行分析,筛选目的基因舜口蛋白,探讨它们与的关系,:①胶质瘤的分离,培养和鉴定研究:在褐柿临床标本,以及和褐柿鱿赴抵校ü苯优嘌痛攀庋择细胞二种方法分离。参照嘌跫刑逋培养。利用免疫荧光染色检测细胞标记,包括,珿等,诱导分化试验等方法,对分离后细胞进行验证,,主要是双向凝胶电泳甈否存在,并分析魑狟砻姹昙牵糜贐掷南京医科大学博士学位论文
②蛋白质组学研究:通过磁殊选择分离赴蠧幌赴甈觳馍鲜鱿赴芴宓鞍祝治霾钜煨缘白点。,分析结果,:将基因组学和蛋白质组学研究所得结果相结合,以差异性蛋白为线索,在蚉仁菘庵薪行检索,获得对应的基因名称蛩跣细胞差异性基因文库中进查找,进行和唤褐柿鱿赴结果:①胶质瘤的分离,培养和鉴定研究:俅脖瓯中,有谂嘌讨谐鱿稚窬颍例均为儿童恶性胶质瘤,性星形细胞瘤来源的神经球能够长期培养;在成ㄖ柿鲋芯闯鱿神经球。和赴校渤鱿直冉系湫偷纳窬颍苯优嘌细胞培养二种方法结果相同。神经球细胞具有增殖能力,,和阴性。经诱导后,发生分化,分化细胞形态与来源细胞相似,能够表达虶榷嘀直硇拖赴昙恰"贐鞍字首檠а究:和幌赴涠员冉希型臣蒲Р钜的倍差异蛋白点有个,,有个蛋白表达增多系,,:利用珿编号缓蟾菡庑┬畔⒅鹨辉差异性蛋白和基因筛选。分别是小脑蚓部髓母细胞瘤,,大于倍差异蛋白点有个,大于共得到张高质量质谱肽质量指纹图谱值鞍南京医科大学博士学位论文
,和籙细胞比较,差异性基因数为觯渲校系骰个,,与翻译调控功能相关的基因,差异性基因所占比率最大,,,至虲一胶质瘤细胞差异性蛋白和基因筛选:通过查找,与二个文库都有关联的蛋白有觯对应龌颍直鹞猅籩,,与蛳,与蛳喙亍结论:①在胶质瘤中,存在具有匦缘母上赴碆荁匾1砻姹昙牵珻褐柿鱿赴荁梢用于的分离。③通过蛋白质组学和基因组学研究,分别建立了面标记,以及分化机理提供了重要线索。②将蛋白质组学和基因组学研究结果结合,可以弥补各自的不足,提供更多信息,缩小研究范围,结果更加准确可靠。通过分析得到了龌蛩纯谙喙氐个