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苯甲脒琼脂糖凝胶4FF使用说明.pdf

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苯甲脒琼脂糖凝胶4FF使用说明.pdf

上传人:陈潇睡不醒 2021/3/31 文件大小:122 KB

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苯甲脒琼脂糖凝胶4FF使用说明.pdf

文档介绍

文档介绍:
苯甲脒琼脂糖凝胶 4FF 使用说明
货号 :S9400
规格 :25mL
产品简介 :
苯甲脒类物质是丝氨酸蛋白酶的广谱抑制剂,所以将这类物质偶联到琼脂糖凝胶上,可
以从各种来源的样品中一步纯化胰蛋白酶、凝血酶、尿激酶、激肽释放酶、前激肽释放酶等
丝氨酸蛋白酶。
苯甲脒琼脂糖凝胶由于应用新的活化方法所以流速高, 非特异吸附少, 而且填料粒度
均匀,所以分离效果好,是纯化丝氨酸蛋白酶类最适合的填料。
亲和填料特征 :
特点 载量大,分辨率好,流速高,使用方便。
基质 4%的交联琼脂糖凝胶
配基 苯甲脒
配基密度 7µmol /ml
吸附载量 13 mg 胰蛋白酶/ml
填料的颗粒大小 45-165µm
最大流速 300cm/h
pH 范围 3-10,在位清洗时 pH 范围可到 2-11
保存温度 +4~8℃
保存液体 20%乙醇

适用范围:
一步从各种样品中纯化丝氨酸蛋白酶类物质。
应用实例:
实验名称:苯甲脒琼脂糖凝胶 FF 分离尿激酶。
实验步骤:
(1)苯甲脒琼脂糖凝胶 FF 装柱,×20m,柱床体积为 10ml
(2)用缓冲液 1 平衡 2-5 个床体积,流速为 2ml/min
(3)取尿激酶粗品 200mg 溶解在 20ml 的缓冲液 1 中,用 µm 的滤膜过滤,上样,
流速为 1ml/min
(4)用缓冲液 1 再洗 2-5 个床体积,流速为 2ml/min
(5)最后缓冲液 2 进行洗脱,流速为 2ml/min,收集洗脱峰,用 SDS-PAGE 纯化后的效
果。
(6)用纯水洗 5 个柱床体积,然后分别用 100mM,-HCl 缓冲液含 1M NaCl