文档介绍：南京林业大学
硕士学位论文
大田试验转基因杨树无性系的抗虫性研究
姓名:白亚蒙
申请学位级别:硕士
专业:林木遗传育种
指导教师:诸葛强
20040601
“,姗扔口鹂,眦聊幕的转抗虫基因摘要抗虫性存在着明显的时间动态,六月较高,%下降至月的本研究以美洲黑杨×小叶杨“,搬出肋鱔膀隞閛的优良无杨树是重要的速生材树种之一,采用基因工程技术开展转基因杨树的研究是培育抗逆、抗虫和抗病杨树新品种的有效途径。奈扌韵滴2牧希渲蠳定植时间为三年,新疆杨”,淞口味耐矗船ㄖ彩奔湮R荒辏辛艘幌盗械姆肿蛹觳饧翱钩嫘圆舛ā分子检测结果表明转单基因钍骱妥狢蛐陆睿┰龀隽擞胫柿大小一致的条带,表明其外源基因仍稳定存在于基因组中,但转基因杨树的挥欣┰龀鲇胫柿R恢碌奶醮湓蛴写ú窖芯俊分析表明,所检测的转基因钍魑扌韵抵蠦镜鞍妆泶锎嬖谧挪钜欤渲凶植物叶片可溶性总蛋白的%、%、%。中等以下的抗性转基因杨树无性系的表达含量为蝕鲜叶。部分转基因植株的杀虫实验表明,转基因钍鞫匝钚≈鄱甑幕记幼虫的生长有明显的抑制作用,但对化蛹后的幼虫生长及其蛹重的影响不大。本研究证实转基因抗虫杨树无性系大田移植植株在室内控制和自然条件下对杨小舟蛾具有显著的抗虫效果,,以的定期死亡率为最高。不同龄期的杨小舟蛾幼虫对杨的敏感性不同,随着虫龄的增大,敏感性显著减弱。.另外杨树对杨小舟蛾的.%,%。通过对实验结束时所有不能化达含量也高,说明两种方法可以相互代替,关键词转基因杨树;抗虫性;苏云金芽孢杆菌毒蛋白基因;豇豆胰蛋白酶抑制剂基因基因植株镀猩背娴鞍缀砍毕室叮挤直鹫蛹的幼虫进行分析,结果表明用转基因无性系叶片处理后,幼虫的取食量、体重增长速率与对照存在极显著的差异。本研究经分子和生物测定,结果一致,抗虫性较高的无性系其毒蛋白表取长补短。阳
朋蠵,口,“船如加緓融押由冢甅癐抒匆耤廿緎鱢把. ·觚⌒’.ヒ灰%锄,芿’.%%.ァ%辴,:订甌、Ⅳ,甀骾.,,∞襝瞫协怙...眩畁,鹲痵.
致谢本论文是在诸葛强副教授的悉心指导下完成的。从论文的选题到论文的写作勤奎认真的工作态皮,引导我初探科学之曲径,培养我求实剞蝌的科学精神。使致以我最诚挚的谢意。感谢本教研妞的王明庥院士,,徐立安教授,、。在此我要特别的唐谢王婕琛师姐和程强师兄在实验技术和论文写作方面蛤同时我还要唐谢张博博士、、、艾惦,江文波、吕秀立、许秀玉,还有邓玉营师弟,高磊师弟,房丹师珠,蛱晨师妹等。他们的无私帮助与他们的友谊将成为我人生最后感谢我的父母、姐姐和朋友,是他们在我求学的每一个阶段给予的支持作者:白亚蒙无不受到老师的谆谆教诲。导师的求实严谨的科学态度,精深渊博的学识修养,我收益非浅。在南蛛学习和生活的几年间,,都得到了老师的许多关注,我的每一个进步与他的关心和帮助是分不开的。在此中的一段美好的回忆。永远珍藏在南林的这一段美好的时光。予的热心指导。和鼓励。.,、。
组分析;分离与鉴定了一些树木的基因;自年第一种转基因树木⋯耐除草洲和非洲陆续释放到野外进行田间试验。但目前只有一种基因工程树⋯抗病毒第一部分文献综述林木基因工程研究作物所采取的一种经过诱变的细菌“基因”。该基因编码幌┐急K崦草酸一涣姿岷铣擅福芙到獬菁敛蒈侦ⅰ6栽咏谎钍鹘凶猙基因嗦草丁膦一灰阴WR泼或转世纪年代,就在生物工程向农业大举进军并取得辉煌成果的时期,林业生物工程也随之悄然兴起。但树木的转基因比农作物难度大,因为树木有其自身的特殊性,这包括:①树木的类型复杂,涉及被子植物和裸子植物,而农作物则单纯是被子植物;②树木的基因组非常大,相当于人类基因组的倍,研究困难;③树木生命周期长,种植周期也长,即使对于人工林,一般也在十年以上。导入的外源基因长期表达的稳定性,需要经过多年观察,因此研究速度缓慢。此外,树木的分子生物学和发育生物学研究远比农作物薄弱,缺乏开展林业生物工程所此,过去年来林业生物工程也有不少长足进步。主要开展了基因导入的方法学研究:树木的基因定位凸δ芊治觯灰芽J冀惺桌髂杨树番木瓜已在美国正式批准进行商业化种植。尽管基因工程树木的研究还处在萌芽时期,是一个尚不发达的生物工程领域,但却引起人们的深切