第七章 种子扩大培养.ppt

文档介绍：第七章
生产菌种的扩大培养与保藏
第七章
生产菌种的扩大培养与保藏
定义
种子扩大培养:是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后,在经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级放大培养而获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。
作为种子的准则
菌种细胞的生长活力强,移种至发酵罐后能迅速生长,迟缓期短;
生理形状稳定;
菌体总量及浓度能满足大容量发酵罐的要求;
无杂菌污染;
保持稳定的生产能力。
本章讲述的内容
第一节种子的制备过程
第二节种子质量的控制
第三节实例
第四节生产发酵罐的无菌接种
第五节菌种的保藏与复壮
第一节种子的制备过程
种子制备的过程大致可分为:
实验室种子制备阶段
生产车间种子制备阶段
一、实验室种子的制备
实验室种子的制备一般采用两种方式
对于产孢子能力强的及孢子发芽、生长繁殖快的菌种可以采用固体培养基培养孢子,孢子可直接作为种子罐的种子,这样操作简便,不易污染杂菌。
对于产孢子能力不强或孢子发芽慢的菌种,可以用液体培养法。
(一)孢子的制备
1,细菌孢子的制备
细菌的斜面培养基多采用碳源限量而氮源丰富的配方。
培养温度一般为37˚C。
细菌菌体培养时间一般为1~2天,产芽孢的细菌培养则需要5~10天。
2,霉菌孢子的制备
霉菌孢子的培养一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。
培养的温度一般为25~28˚C。
培养时间一般为4~14天。
3,放线菌孢子的制备
放线菌的孢子培养一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。
培养温度一般为28˚C。
培养时间为5~14天。
(二)液体种子制备
1,好氧培养:
对于产孢子能力不强或孢子发芽慢的菌种,如产链霉素的灰色链霉菌(S. griseus)、产卡那霉素的卡那链霉菌(S. Kanamuceticus)可以用摇瓶液体培养法。将孢子接入含液体培养基的摇瓶中,于摇瓶机上恒温振荡培养,获得菌丝体,作为种子。
试管→三角瓶→摇床→种子罐