文档介绍：第四章种子的扩大培养
种子扩大培养的目的与要求
种子制备实例
种子制备的技术概要
种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后,再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。
第一节种子扩大培养的目的与要求
种子扩大培养的概念:
种子扩培的目的
接种量的需要
菌种的驯化
缩短发酵时间、保证生产水平
种子的要求:
总量及浓度能满足要求
生理状况稳定,个体与群体
活力强,移种至发酵后,能够迅速生长
无杂菌污染
第一节种子制备过程举例
一、谷氨酸生产的种子制备
制备过程
斜面菌种
→一级种子培养
→二级种子培养
→发酵
1、斜面()
培养基:蛋白胨 1%,牛肉膏1%,氯化钠
琼脂 2%, pH -
培养基特点:有利于菌体的生长,原料比较精细
培养条件:32℃,生长18-24小时
生长斜面要求:生长良好,所使用斜面连续传代不超过
3次
2. 一级种子(摇瓶)
培养条件:于1000ml三角瓶中,装液200-250ml,32℃培
养12小时。
培养基:葡萄糖2%,%,玉米浆 %,
K2HPO4 %
培养基特点:有利于菌体的生长,所使用的原料已经基
本接近于发酵培养基
3. 二级种子(种子罐)
培养条件:在种子罐中培养(容积为发酵罐的1%),
32℃培养7-10个小时
培养基:和一级种子相似,其中葡萄糖用水解糖代替,
%
培养基的特点:长菌体,更接近于发酵培养基
种子的质量要求:
108-109个/ml
大小均匀,呈单个或八字排列
PH -,→8→-
活力旺盛
二、青霉素生产的种子制备
制备过程
安培管
→斜面孢子
→大米孢子
→一级种子
→二级种子
→发酵
一、斜面孢子
培养基:甘油、葡萄糖、蛋白胨等
培养基特点:有利于长孢子,用量少而精细
培养条件:25℃、7天, 注意湿度50%左右