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上传人:changjinlai 2021/4/19 文件大小:40 KB

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文档介绍

文档介绍:1. 基因芯片又称 DNA芯片 (DNA chip )
或 DNA微阵列 (DNA microarray)
。其原理是采用光导
原位合成或显微印刷等方法将大量特定序列的探针分子密集、有序地固定于经过相应处理
的硅片、玻片、硝酸纤维素膜等载体上
, 然后加入标记的待测样品 , 进行多元杂交 , 通过杂交
信号的强弱及分布 , 来分析目的分子的有无、数量及序列
, 从而获得受检样品的遗传信息。
其工作原理与经典的核酸分子杂交如
Southern 和 Northern
印迹杂交一致 , 都是应用已知核
酸序列与互补的靶序列杂交
, 根据杂交信号进行定性与定量分析。经典杂交方法固定的是靶
序列 , 而基因芯片技术固定的是已知探针
, 因此基因芯片可被理解为一种反向杂交。基因芯
片能够同时平行分析数万个基因
, 进行高通量筛选与检测分析
, 解决了传统核酸印迹杂交技
术操作复杂、自动化程度低、检测目的分子数量少等不足。根据所用探针类型
, 基因芯片可
分为 cDNA ( comp lement DNA)
芯片和寡核苷酸芯片
; 根据检测目的又可分为表达谱芯片和
单核苷酸 多态性 ( single nucleotide polymorphisms, SNP)
芯片。随着芯片技术在其他生
命科学领域的延伸 , 基因芯片概念已泛化到生物芯片,
包括基因芯片、蛋白质芯片、糖芯片、
细胞芯片、流式芯片、组织芯片和芯片实验室( laboratory on a chip)

蛋白质芯片是一种高通量的蛋白功能分析技术,可用于蛋白质表达谱分析,研究蛋白质与
蛋白质的相互作用,甚至 DNA-蛋白质、 RNA-蛋白质的相互作用,筛选药物作用的蛋白靶点等。蛋白芯片技术的研究对象是蛋白质,其原理是对固相载体进行特殊的化学处理,再
将已知的蛋白分子产物固定其上(如酶、抗原、抗体、受体、配体、细胞因子等),根据这些生物分子的特性,捕获能与之特异性结合的待测蛋白(存在于血清、血浆、淋巴、间质液、尿液、渗出液、细胞溶解液、分泌液等),经洗涤、纯化,再进行确认和生化分析;它为获得重要生命信息(如未知蛋白组分、序列。体内表达水平生物学功能、与其他分子的相互调控关系、药物筛选、药物靶位的选择等)提供有力的技术支持。
基因芯片(又称 DNA 芯片、生物芯片)技术,就是通过微加工技术 ,将数以万计、乃至百万计的特定序列的 DNA片段(基因探针),有规律地排列固定于 2cm2 的硅片、玻片支持物上,构成的一个二维 DNA探针阵列,与计算机的电子芯片十分相似,所以被称为基因芯片。


2. 广义概念的定量

PCR技术是指以外参或内参为标准,通过对

PCR终产物的分析或

PCR过
程的监测,进行 PCR起始模板量的定量。狭义概念的定量 PCR技术(严格意义的定量 PCR 技术)是指用外标法(荧光杂交探针保证特异性)通过监测 PCR过程(监测扩增效率)达到精确定量起始模板数的目的,同时以内对照有效排除假阴性结果 ( 扩增效率为零 )

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