文档介绍：· 试 验 研 究 · 北方蚕业 ，
适 于滞 育 期 蚕 卵 的基 因组 提 取 方 法
刘 洋 焦 锋 薛忠民 苏 超
西北 农 林 科 技 大学 蚕桑 丝绸 研 究 所 ，陕 西 杨 凌
摘 要 家蚕 以 卵滞 育 ，蚕 卵保 存 时 间 长 ，取 样 方 便 ，但 是 含 量 较 低 ，抽 提 较 为 困难 ，利 用 不 多 。从 处 于
滞 育期 丙胚 子 前 的 蚕 卵 中快 速 高效 地 获 取 基 因组 ，对 于提 高 家蚕 研 究效 率 具 有 实 用 价 值 。本 试 验
对 两种 法和 一 种 法 的 抽提 效 果 进 行 比较 ，结果 表 明 — 提 取 效 果较 好 ，单 粒 蚕 卵提 取 基 因组
即可 用作 模 板 ，粒 蚕 卵 获得 可 以 基 本 满 足 分 子 生 物 学研 究 需 要 。
关 键 词 家蚕 滞 育 期 蚕 卵 抽 提
提取是 家蚕 分子遗 传 学研 究 的基 本 技 家蚕基 因组 提取
术 ，也是 品种鉴 定 和 纯 度检 测 研 究 中较 为 常见 的 ．． 方 法 —
问题 。现有 的报 道 大多 从 丝 腺 、蚕 蛹口 或 转 方 法 — ，参 照 夏 庆 友等 的 方 法 ，
青期 蚕 卵。中提 取 。尽 管 家 蚕 以卵 滞 育 ，从 春 略 加 改 动 。抽 提 过 程 为 ：① 将 蚕 卵放 人 预冷 的研
蚕期 制种 结束 到次 年蚕种 出库 ，蚕 卵保存 时 间长 ， 钵 中，加 入 液 氮 快 速 研 磨 成 细粉 末 ，转 移 到 加 有
取样 方便 ，但 滞 育 期 含 量 仅 为 ．／粒 ． 抽 提 缓 冲 液 ／—
卵 ，从 滞 育期蚕 卵 中抽 提 较 为 困难 ，因而 不 ．，．／．，． 的
常采 用 。蚕 卵 解 除滞 育 孵 化 前 含 量 可 达 离 心管 中 ，混 匀 ；② 加 入 蛋 白酶 至终 浓 度
／粒 ，增 加 近 倍 ，因 而 从 蚕 卵 中 提 取 ／ ，℃消 化 过夜 ；③ 加 入 等体 积 平 衡 酚 ，
，大 多需 要 进 行 催 青 促 使 蚕 卵 发 育 以增 加 在 冰上 温和振