文档介绍：实验七无菌操作及接种技术
一、微生物接种技术
一）、实验目的
学****微生物接种工具的使用，掌握无菌操作方法，建立有菌概念。
二）、实验原理
无菌技术：指在微生物实验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。
接种：将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程。
三）实验用品
四）实验步骤：
1、接种工具的介绍
接种环、接种钩、接种针、接种圈、接种锄、玻璃涂棒、其他接种工具
2、超净工作台
超净工作台是为实验室工作提供无菌操作环境的设施，以保护实验免受外部环境的影响，同时为外部环境提供某些程度的保护以防污染并保护操作者。
原理：超净工作台的洁净环境是在特定的空间内，洁净空气(进滤空气)按设定的方向流动而形成的。以气流方向来分，现有的超净工作台可分为垂直式，由内向外式以及侧向式。
垂直流超净工作台
水平流超净工作台
垂直流超净工作台
超净台的使用与维护
-
使用前打开紫外灯照射40~60min
开启超净工作台工作电源，关闭紫外灯，并用75%%过氧乙酸喷洒擦拭消毒工作台面。
使用中，有机玻璃罩受到污染，严禁用酒精棉球擦拭，请用含水棉布檫拭；
请保持超净台整洁、干燥，不要堆积杂物；
使用完毕，关闭煤气开关或酒精灯；
使用完毕后，用消毒液擦拭工作台面，关闭工作电源，重新开启紫外灯照射15min.
定期做无菌试验，以测定净化台是否符合无菌要求。
2、无菌操作要点
1）、要求建立“有菌概念”。
2）、接种时要有一个洁净的环境，整个操作过程必须在火焰旁进行。
3）接种环，棉塞一定要拿在手上，不能随便乱丢。
3、微生物接种技术
1）、斜面接种技术
从斜面菌种将菌移接至另一斜面培养基的方法，叫做斜面接种。
接种方法：
A、接种前用酒精棉球擦净桌面；
B、将试管贴上标签，注明菌名、接种日期、接种人姓名等，然后用酒精棉球擦手消毒；
C、点燃酒精灯以后，在火焰旁将每一支试管内的棉塞稍微转一下，使其松动，以便在接种时易拔出，并将试管放在试管架上，放在接种台的右前方；
D、将菌种和斜面培养基的两支试管，用大拇指和其他四指握在左手中，使中指位于两试管之间的部分，斜向上，并使他们呈水平位置，也可将试管横放在左手掌中央，用四个手指托住试管，大拇指压在试管上，斜面向上；
E、右手拿接种环，在火焰上将环的部分烧红灭菌，环以上凡在接种可能进入试管内的部分，均应通过火焰灼烧。（见图4）