文档介绍：称猴桃属植物的遗传多样性及种质超低温保存研究
摘要
中国是称猴桃属植物的起源和分布中心,种质资源极为丰富,可为称猴桃遗
传改良和资源利用提供广泛的背景材料。长期以来,对称猴桃属植物的遗传多样
性尤其是水平上的遗传多样性及种质的超低温保存缺乏系统研究。鉴于此,
作者以重要分布区之一的江西称猴桃属植物为对象,在查清其种类、分布及若干
性状评价的基础上,进行分析与种质超低温保存的研究。主要结果如下
江西称猴桃属植物的分布及若干性状评价
通过野外实地调查与查阅标本,对江西称猴桃属植物的分布状
况进行系统研究,基本查清了其分布种类及规律。结果表明,江西境内分布有称
猴桃属植物种变种,其中葛枣称猴桃
、灰毛称猴桃、楔叶称猴桃
和簇花称猴桃为江西首次发现。
依据其种类与变种的多样性形态特征,编制了江西称猴桃属植物分类检索表。
江西称猴桃属植物的地理分布区域较广,中华称猴桃在全省各地均有分
布,各种类与变种之间对气候及土壤等生态条件要求的多样性导致其地理分布的
广泛性。其区系特征主要表现为种类丰富,特有现象较明显,江西分布国有特
产种种,占国产该属特有种的,其中有种为江西特有种间、种内
分化较强烈,江西称猴桃属植物的种与变种在该属个组均有代表与邻近地区
称猴桃属植物的关系密切,其中与福建关系最为密切。
通过对主要种与变种果实性状观测、营养成分和氨基酸含量测定,表明
江西称猴桃属植物在果实形状、毛被状况、果皮色泽、果肉色泽、果实风味、果
实含量及氨基酸含量方面存在丰富的多样性。
对江西称猴桃属植物中的矮型赣称号和耐贮中华称猴桃特异
种质资源进行了初步研究,为其保存与利用莫定基础。
称猴桃属植物的分析
种经优化的称猴桃基因组提取方法即区室法、区室法、
常规法、常规法均适于提取称猴桃嫩叶基因组。经综合对比分析,
认为区室法为称猴桃属植物分析的最佳方法,其步骤简单、快捷,抽
提的基因组降解少、杂质含量少,能获得高质量的模板。通过对所得到
的模板进行分析,获得了清晰的指纹图谱。
从试剂盒所提供的对引物组合中筛选出扩增带信号强度一致性
好、条带分布均匀、多态性高的对引物组合即
和对份称猴桃种质进行了指纹分析。对引
物共得到扩增位点个,其中多态性位点个,多态性比例为,区分
率达。该对引物适用于称猴桃属植物的分析各种质的多态性带数
存在差异,多态性带数最多的是黑蕊称猴桃条,多态性比例为多
态性带数最少的是早鲜称猴桃条,其多态性比例为。结果进一步显示,
称猴桃属植物在分子水平上存在丰富的遗传多样性。
首次运用技术构建了份称猴桃种质的指纹图谱,通过对扩
增结果进行聚类分析,其相似系数为,表明种质之间遗传关系
较远。依相似系数的水平,将供试的份称猴桃种质分为个类群净果
组和斑果组为一类群,糙毛组为一类群,星毛组为一类群,中华称猴桃和美味称
猴桃为一类群,该结果与传统的果面毛被特征和皮孔状况的形态分类系统中组的
划分大体一致,并有按地理分布聚类的趋势。的分子分类可弥补传统形态
分类系统的不足,其分类范围更细,可为称猴桃属植物的分类提供依据。
聚类分析表明,称猴桃属植物矮型种质“赣称号”独立于中华称猴桃
种,基于指纹,从分子水平上分析,可提升为称猴桃属中华称猴桃种内的
一个变型。
称猴桃种质超低温保存研究
以“赣号”为试材,筛选了其离体培养的激素组合。
与十较适于称猴桃外植体的诱导及增殖。无菌小芽在
培养基上出根率较高,根系生长正常。
称猴桃的组培苗每周继代一次,在增殖培养基上连续继代次后转
入到低浓度生长调节剂的培养基上继代一次,然后继续增殖。生根试管苗经炼苗
移栽后可达到的成活率。
首次采用玻璃化法保存了称猴桃种质离体茎尖,其适宜的程序为继代
的长嫩梢,接种到含蔗搪的培养基上,℃低温下锻炼周。切
取的茎尖,于蔗糖基本培养基上预培养,在
室温下用十蔗糖预处理,再于。℃下用脱水处理
,换一次新鲜的溶液后,迅速投入到中。保存后,在
水浴中化冻,用蔗糖基本培养基洗涤两次后接种到恢复培养基上,可
获得的成活率和的再生率。超低温保存后的称猴桃无菌小苗在形态
上与对照一致。
应用流式细胞仪和对超低温保存后的材料进行倍性检测以及超低温
保存过程中细胞的超微结构变化进行观察。结果表明,其染色体倍性未发生变异。
在含蔗糖的培养基上,℃低温下锻炼周后的茎尖以及在℃下
脱水处理后的茎尖,细胞发生的质壁分离逐渐加重在中保存迅
速解冻后的茎尖,有部分细胞虽然细胞结构发生了变化,但程度不深,是可逆的
伤害,在恢复培养时会自动修复,并能再生出植株。
关键词称猴桃属植物遗传多样性超低温保存
加脚
加