文档介绍：第二军医大学
博士学位论文
TPX2在脑胶质瘤中的表达及其对脑胶质瘤进程的影响的实验研
究
姓名:李宾
申请学位级别:博士
专业:外科学(神经外科)
指导教师:卢亦成;胡国汉
20100501
摘要一人脑胶质瘤中的表达和临床病理相关性及生存分析脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤之一,约占全部脑肿瘤的~%。目前,脑胶质瘤的治疗手段主要包括手术治疗、放射治疗、化学治疗和综合治疗等,,但由于胶质瘤呈浸润性生长,与周围腑组织无明显分界且易于复发,且疗效均不甚理想。新的治疗手段如基因治疗等虽有望成为治愈胶质瘤的途径之一,但是目前仍缺乏理想可靠的治疗靶标。因此寻找调控胶质瘤细胞恶性生物学行为的分子靶标,明确其在胶质瘤发病过程中的病理机制,已成为神经外科领域的研究热点之一。本研究拟通过观察在不同病理级别脑胶质瘤以及胶质瘤细胞株中的确切表达情况,并通过研究在胶质瘤细胞株中的异常表达,研究在胶质瘤发生发展过程中的功能角色。实验共分为三个部分:第一部分,观察在脑胶质瘤组织中的表达水平以及与胶质瘤病理级别的相关性,调查的表达水平与胶质瘤患者生存时间的关系;第二部分,观察在和越褐柿鱿赴曛械膍蛋白表达水平,并调查蛋白在赴诘难窍赴ㄎ唬坏谌糠郑ü齊干扰的方法抑制基因在胶质瘤细胞内表达,观察其对褐柿鱿赴晟ぁ增殖、,探讨参与脑胶质瘤发生发展以及恶变的分子病理机制,有助于明确胶质瘤的恶性生物学行为及机理,有望为胶质瘤的临床治疗提供新的分子靶标。日的:研究在脑胶质瘤组织中表达水平及其与胶质瘤病理级别的相关性,表达水平同胶质瘤患者生存时间的关系。方法:采用免疫组化染色检测D宰橹煌侗鹉越褐柿鲋蠺的表达情况。临床调查胶质瘤患者,利用生存分析检验表达水平同患者生存时间的相关性。然后用实时定量和杂交分别检测组织中蛋在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤进程的影响的实验研究响。
第二部分在褐誓赶赴鱿赴曛械谋还白和在的表达水平。并分析表达水平同胶质瘤级别的相关性。结果:采用免疫组化法检测了D宰橹四越褐柿鍪瓯局蛋白的表达情况。结果显示,正常脑胶质细胞蛋白染色为阴性,绝大部分胶质瘤标本中可见蛋白的阳性表达。在大部分其它类型的胶质瘤中也可见蛋白的阳性表达。。生存分析表明,,应用检测在例不同级别脑胶质细胞瘤和D宰橹械谋泶锵允荆篢表达水平在胶质瘤组织中明显上调,⑶遥琓水平在高级别胶质瘤组织中的表达水平明显高于低级别胶质瘤,二者相比差异显著同样,利用法测定蛋白在上述胶质瘤组织的表达,结果显示:蛋白在胶质细胞瘤组织中表达明显上调,与正常脑组织相比差别显著。,.。结论:在脑胶质细胞瘤可见阳性表达。其表达水平同脑胶质瘤的级别呈明显相关,同胶质瘤患者的生存时间呈负相关。关键词:胶质瘤,病理级别,,生存时间研究在胶质母细胞瘤赴礥和中的、蛋白表达水平以及蛋白在赴诘难窍赴ㄎ磺榭觥方法:应用法检测在赴礥和中的表达水平,应用细胞法研究在蚒赴抵械牡鞍妆泶锼平。应用免疫荧光染色,共聚焦显微镜系统检测蛋白在赴诘谋泶锛亚细胞定位情况。结果:结果提示表达水平在胶质瘤细胞系蚒第二军医大学博宦畚’上目的:.
凋亡的作用以及对部分细胞周期相关性蛋白的影响第三部分异常表达对褐柿鱿赴ぁ⒃鲋澈中明显上调,。免疫荧光染色显示,蛋白定位于赴四冢⑶彝赴四诜拇柑迕结论:位于细胞核内,且在赴衅鋗偷鞍妆泶锼矫飨愿于正常脑组织。关键词:胶质瘤,,纺锤体目的:研究通过扇乓种芓缀蠖訳胶质瘤细胞株生长、增殖、凋亡的作用。方法:利用扇乓种芔细胞株内的表达。观察细胞生长,同位素渗透法测定细胞增殖。流式细胞仪及旧ḿ觳庀赴蛲霾舛ㄏ胞凋亡。和测定异常表达的细胞株、、萴偷鞍妆泶锼奖浠结果:转染捎行У贾耈细胞内的表达。抑制了表达的细胞株同未转染组相比,其生长、增殖明显降低均.>,表达均较对照明显降低,而蚦表达均明显增加,的表达无显著变化。同样,在实验中我们发现上诉蛋白表达同样有类似结果。结论:可促进赴纳ぁ⒃鲋场⑶窒⒌贾轮琢鱿赴蛲黾跎佟敲除表达可促进肿瘤细胞的生长、增殖、侵袭,并促进肿瘤细胞的早期凋亡。同时,抑制表达可导致细胞周期相关性蛋白蚏的表达明显下调,。由此可