文档介绍：中南大学
博士学位论文
大鼠移植心脏的蛋白质组学研究
姓名:章庆春
申请学位级别:博士
专业:外科学
指导教师:尹邦良
20060401
大鼠移植心脏的蛋白质组学研究摘要研究背景随着免疫抑制剂的应用,心脏保存以及心脏外科技术的进步和高效抗感染药物的应用,心脏移植已成为治疗各种终末期心脏疾病的最有效的手段。心脏移植后患者的生存时间也在不断延长,但长期研究表明:移植心脏血管病变,是影响患者长期存活的最主要的原因。根据流行病学的研究,采用环孢霉素:现瘟频男脑嘁浦不颊撸谑后、晷醒9茉煊胺⑾諧的发病率分别为%、%、%。采用血管内超声检查发现心脏移植旰螅9苣谀ぴ龊竦发生率达%。而心脏移植患者发生年的生存率为%,年的生存率为%。非械姆⒉』粕胁磺宄壳叭衔J且免疫因素为主的多因素参与的血管增殖型病变,病理变化表现为局部持续的炎症反应,平滑肌细胞迁移、增殖,形成弥漫性同心圆状血管狭窄,晚期脂质沉积、钙化形成粥样斑块。对恼锒夏壳无可靠的手段,治疗无有效的措施,免疫抑制剂的使用不能控制的进展,保守治疗及、的效果都差,采用西罗莫司洗脱支架对狭窄冠脉进行介入治疗年内再狭窄率为%,再次心脏移植的生存率明显低于初次移植,且由于供心来源有限,多数学者不主张再次心脏移植。因此,彻底弄清托募∠宋发病机制,在此基础上寻找托募∠宋募觳馐侄魏椭瘟品中南文学博士学位论文中文摘要
案是心脏移植研究领域的首要问题。若能直接从蛋白质组入手来研究移植后心脏的蛋白质变化,将可更全面、真实地揭示托募∠宋谋局剩狢和心肌纤维化的发病学和防治研究开辟新的思路、提供新的线索。本研究采用改良的异体大鼠心脏腹部移植的P停谝浦埠早期质鹾周屯砥手术后获取移植心脏标本,利用双向凝胶电泳技术,构建出蛋白质凝胶图像,通过像分析系统,确定差异标准,识别差异点。获取差异点后,提取凝胶内的蛋白质,并鉴定相关差异蛋白质的表达。大鼠异位心脏移植模型的建立及改进目的改良型,建立简单、可靠的大鼠腹腔异位心脏移植模型;方法以大鼠为供体,大鼠为受体,改良建立大鼠腹腔异位心脏移植模型,分为椋赫笫笞魑6哉兆椋灰浦埠笱羌毙耘懦夥从ψ术后;移植后慢性排斥反应组鹾周7肿槲寡蟀垂娑ㄊ奔收获心脏标本进行组织形态学观察。,术中出血过多死亡供心移植吻合时间..,供心冷缺血时间..,腹部触诊移植心脏搏动时间..臁W橹翁Ч鄄焓荆阂浦残脏心肌组织内有大量粒细胞浸润;随着移植后时间延长,鸾ゼ重,冠脉数量减少,心肌萎缩并心肌纤维化发生。结论改良P建立的心脏移植模型具有简单、可靠的优点。收获的移植心脏标本在组织形态学上反映了托募∠宋⑸⒎⒄沟墓蹋=徊中南土学博士学位论文中文摘要
利用蛋白质组学技术研究移植心脏托募∠宋姆⑸硖峁理想的组织标本。大鼠移植心脏的蛋白质组学研究目的:在第一步的基础上,进行移植后心肌组织的蛋白质组学分析,寻找移植后心肌表达的特异蛋白质变化,为托募∠宋姆⒉⊙Ш头乐窝芯靠1傩碌思路、提供新的线索。方法:对移植后不同时间的两组大鼠心肌组织和配对的正常心脏组织进行比较蛋白质组学研究,即利用固相梯度,双向凝胶电泳—一掷氪笫笠浦埠笮募∽橹驼P募∽橹的总蛋白质,考马斯亮蓝染色后经图像分析识别差异表达的蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱猘猅—ú钜毂泶锏牡鞍字实恪=峁得到了分辨率较高、重复性较好的大鼠移植后心肌组织和正常心肌组织的双向凝胶电泳图谱禾鮬,移植后两组心肌组织和正常配对组织各平均胶的平均蛋白质点数分别为±和煌樾募∽橹块不同的胶之间蛋白质点在等电聚焦,±;冉戏治阶橐浦埠笮脏组织与正常配对的心脏组织的双向凝胶电泳图谱,平均匹配的点数/琒—中南土学博士学位论文———中文稿要,
为业讲钜斓鞍字实觯对个差异蛋白质点进行了肽质指纹图分析,鉴定出一些与心肌代谢、应激与抗应激反应、信号传导与增殖有关的蛋白质。结论:脑嘁浦埠笮募∽橹⑸代谢转变,即向无氧、“胚胎”形式转化;脑嘁浦埠笮脑嘧织中应激反应与抗应激反应失衡,加重心脏组织的损伤及损伤后的心肌重建;浦埠笮脑嘧橹泄缺泶锏牡ニ堪彼峒っё刺宓鞍—捅泶锏暮讼瞬愕鞍譇/疌瓤赡茉谝浦埠笮脑嗟南宋虲的发生、发展中发挥重要作用。关键词鼠,心脏移植,能量代谢,移植后冠脉病变,心肌纤维化,蛋白质组学和中南大学博士学位论文中文摘要
甌襡琹琲%,%,%%.,%,%.,,中南土学博士学位论文英文稿要,.瓹琧琹琭甌,
,琩籬畂籑—甒甌琲%畂中南土学博士学位论文英文摘要甆籩;.,狣.:—
瑃疜痙,.,.甌..瑃,,
..篢.,猟ィ瓼.%..中南大学博士学位论文英文捕要,../瑀,:,
.畉;琫琺,中南大学博士学位论文英文捕